[發(fā)明專利]一種硫糖肽的純化工藝有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110227778.2 | 申請日： | 2011-08-10 |
| 公開（公告）號： | CN102321151A | 公開（公告）日： | 2012-01-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李剛;李全義;王新志 | 申請（專利權(quán)）人： | 山東眾山生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C07K2/00 | 分類號： | C07K2/00;C07K1/18 |
| 代理公司： | 濟南泉城專利商標事務(wù)所 37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 276807 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 糖肽 純化 工藝 | ||
1.一種硫糖肽的純化工藝，其特征是包括以下步驟：
（1）樣品準備：將硫糖肽粗品溶解于1wt%的氯化鈉溶液中，硫糖肽濃度為5wt%，用醋酸調(diào)節(jié)pH值為6.0；
（2）緩沖溶液的配制：分別配制濃度為1wt%、4wt%和10wt%的氯化鈉緩沖溶液，分別加入醋酸0.05M，調(diào)節(jié)pH為6.0；
（3）離子層析柱預(yù)處理：離子交換柱中填充瓊脂糖凝膠6B，填充體積與被分離樣品的體積比為1：2，用10wt%的氯化鈉緩沖溶液沖洗離子交換柱，用量為3倍樹脂體積，然后用1wt%的氯化鈉緩沖溶液平衡離子交換柱，用量為3倍樹脂體積；
（4）樣品上柱：流速控制2倍樹脂體積/h，上完樣品后，用1wt%的氯化鈉緩沖溶液沖洗，用量為1倍樹脂體積；
（5）洗滌：用4wt%的氯化鈉緩沖溶液洗滌離子交換柱1小時，流速為2倍樹脂體積/h；
（6）洗脫：用10wt%氯化鈉緩沖溶液洗脫離子交換柱1小時，流速為2倍樹脂體積/h，得洗脫液；
（7）超濾脫鹽：將洗脫液用孔徑0.45μm濾膜過濾，然后用3萬分子量的超濾膜進行超濾脫鹽至鹽度2%，再濃縮至洗脫液體積的3/4；
（8）沉淀、干燥：用95%以上的乙醇按體積比1:1將濃縮液在攪拌條件下沉淀，所得沉淀脫水干燥，得到純化的硫糖肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的純化工藝，其特征在于瓊脂糖凝膠6B載量為110mg/mL，粒徑45-165μm。
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