[發明專利]一種硫糖肽的純化工藝

有效

• 申請號: 201110227778.2
• 申請日: 2011-08-10
• 公開（公告）號: CN102321151A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 李剛;李全義;王新志
• 申請（專利權）人: 山東眾山生物科技有限公司
• 主分類號: C07K2/00
• 分類號: C07K2/00;C07K1/18
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

1.一種硫糖肽的純化工藝，其特征是包括以下步驟：

（1）樣品準備：將硫糖肽粗品溶解于1wt%的氯化鈉溶液中，硫糖肽濃度為5wt%，用醋酸調節pH值為6.0；

（2）緩沖溶液的配制：分別配制濃度為1wt%、4wt%和10wt%的氯化鈉緩沖溶液，分別加入醋酸0.05M，調節pH為6.0；

（3）離子層析柱預處理：離子交換柱中填充瓊脂糖凝膠6B，填充體積與被分離樣品的體積比為1：2，用10wt%的氯化鈉緩沖溶液沖洗離子交換柱，用量為3倍樹脂體積，然后用1wt%的氯化鈉緩沖溶液平衡離子交換柱，用量為3倍樹脂體積；

（4）樣品上柱：流速控制2倍樹脂體積/h，上完樣品后，用1wt%的氯化鈉緩沖溶液沖洗，用量為1倍樹脂體積；

（5）洗滌：用4wt%的氯化鈉緩沖溶液洗滌離子交換柱1小時，流速為2倍樹脂體積/h；

（6）洗脫：用10wt%氯化鈉緩沖溶液洗脫離子交換柱1小時，流速為2倍樹脂體積/h，得洗脫液；

（7）超濾脫鹽：將洗脫液用孔徑0.45μm濾膜過濾，然后用3萬分子量的超濾膜進行超濾脫鹽至鹽度2%，再濃縮至洗脫液體積的3/4；

（8）沉淀、干燥：用95%以上的乙醇按體積比1:1將濃縮液在攪拌條件下沉淀，所得沉淀脫水干燥，得到純化的硫糖肽。

2.根據權利要求1所述的純化工藝，其特征在于瓊脂糖凝膠6B載量為110mg/mL，粒徑45-165μm。