[發明專利]一種拉曼編碼微球的用途及利用拉曼編碼微球檢測腫瘤標志物的方法

有效

• 申請號: 201110226795.4
• 申請日: 2011-08-09
• 公開（公告）號: CN102323412A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 張忠平;劉仁勇;蔣長龍;劉變化;關貴儉
• 申請（專利權）人: 中國科學院合肥物質科學研究院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/76;G01N21/65
• 代理公司: 安徽省合肥新安專利代理有限責任公司 34101
• 代理人: 何梅生

1.一種拉曼編碼微球的用途，其特征在于：所述拉曼編碼微球在腫瘤標志物檢測中的應用。

2.根據權利要求1所述的拉曼編碼微球的用途，其特征在于：所述腫瘤標志物為癌胚抗原、甲胎蛋白、前列腺特異性抗原、鐵蛋白、細胞角蛋白、鱗狀細胞癌抗原、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、神經元特異性烯醇化酶、糖類抗原125、糖類抗原199、糖類抗原50、糖類抗原153、糖類抗原724、糖類抗原242或人絨毛膜促性腺激素。

3.利用拉曼編碼微球檢測腫瘤標志物的方法，其特征在于按以下步驟操作：

a、將25mg拉曼編碼微球分散到10mL?pH值為7.4的0.01M的磷酸緩沖液中，加入125μg檢測抗體，在4℃下反應12小時得到納米探針，向所述納米探針中加入質量濃度為1％的牛血清白蛋白封閉納米探針表面空位，離心、洗滌后得到拉曼編碼標記的納米探針；

b、將15mg二氧化硅包覆的磁性納米粒子分散到50mL?2mg/mL的聚乙烯亞胺溶液中，室溫下攪拌30分鐘得到聚乙烯亞胺修飾的納米粒子，將所述聚乙烯亞胺修飾的納米粒子分散到質量濃度為2.5％的戊二醛溶液中反應1小時，離心、用PBS洗滌，然后加入75μg檢測抗體對應的包被抗體，在4℃環境下反應12小時，最后加入質量濃度為1％的牛血清白蛋白封閉未反應的醛基空位，離心、洗滌后得到固相抗體；

所述聚乙烯亞胺溶液中添加有NaCl，NaCl的濃度為0.5M；

c、將50μL含有腫瘤標志物的血清加入到步驟b得到的固相抗體中，在37℃條件下反應1小時，磁性分離、洗滌后加入步驟a得到的拉曼編碼標記的納米探針，在37℃下反應1小時，磁性分離、洗滌后得到免疫復合物；

d、將步驟c得到的免疫復合物吸入毛細管中，利用外加磁場富集后進行SERS光譜的檢測。

4.根據權利要求3所述的利用拉曼編碼微球檢測腫瘤標志物的方法，其特征在于：所述的磁性納米粒子為Fe₃O₄或γ-Fe₂O₃納米粒子。