[發(fā)明專利]一種輔酶A的制備工藝

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110225924.8
• 申請(qǐng)日: 2011-08-08
• 公開（公告）號(hào): CN102321708A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉盛儒;隗青;孫巖;王增鑫;王基偉;張梅村;遲創(chuàng)成
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濟(jì)南維爾康生化制藥有限公司
• 主分類號(hào): C12P19/40
• 分類號(hào): C12P19/40;C12R1/13
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221
• 代理人: 楊琪

1.一種輔酶A的制備工藝，包括微生物發(fā)酵、酶促合成、大孔樹脂吸附、氧化亞銅提純、葡聚糖凝膠層析和還原沉淀六部分，其中，微生物發(fā)酵包括菌種選育、菌種發(fā)酵兩個(gè)階段，其特征在于：所述菌種發(fā)酵階段，所采用的培養(yǎng)基的配方組成如下：葡萄糖：8％～10％；玉米漿：1.3％～1.5％；牛骨或魚蛋白胨：1.5％～1.8％；硫酸鎂：1.0％～1.2％；氯化鈣：0.01％～0.02％，尿素0.8％～1.0％，余量為水，各組分按重量百分比。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種輔酶A的制備工藝，其特征在于，所述養(yǎng)基的配方組成如下：葡萄糖：10％；玉米漿：1.4％；牛骨蛋白胨：1.5％；硫酸鎂：1.0％；氯化鈣：0.01％，尿素0.8％，余量為水。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種輔酶A的制備工藝，其特征在于：所述菌種發(fā)酵階段，發(fā)酵條件為：溫度30～35℃，空氣流量1∶(0.6～1.0)，時(shí)間20～26小時(shí)，發(fā)酵完成后，檢測(cè)pH值、OD值、殘留糖量并鏡檢有無(wú)雜菌。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種輔酶A的制備工藝，其特征在于：所述菌種選育階段，選用產(chǎn)氨短桿菌。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種輔酶A的制備工藝，其特征在于：在所述酶促合成部分，向酶反應(yīng)液中分次加入1次、2次或3次前體物質(zhì)鹽酸半胱氨酸、泛酸鈣和三磷酸腺苷二鈉。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種輔酶A的制備工藝，其特征在于：在所述酶促合成部分，向酶反應(yīng)液中分1次加入前體物質(zhì)鹽酸半胱氨酸、泛酸鈣和三磷酸腺苷二鈉。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的一種輔酶A的制備工藝，其特征在于：所述前體物質(zhì)鹽酸半胱氨酸、泛酸鈣和三磷酸腺苷二鈉的添加量分別為0.1％～0.2％鹽酸半胱氨酸、0.07％～0.08％泛酸鈣、0.2％～0.3％三磷酸腺苷二鈉，按重量百分比。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種輔酶A的制備工藝，其特征在于：所述酶促合成部分，酶反應(yīng)溫度30～35℃，空氣流量1∶(0.3～0.6)，時(shí)間20～24小時(shí)，反應(yīng)過(guò)程中不斷地?cái)嚢瑁环磻?yīng)后，得反應(yīng)液，反應(yīng)液酸化壓濾，得壓濾清液。