[發明專利]一種治療仔豬腹瀉的卵黃抗體注射液的制備方法

無效

• 申請號: 201110223296.X
• 申請日: 2011-08-04
• 公開（公告）號: CN102908620A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 李帥偉;廖榮斌
• 申請（專利權）人: 廣州格拉姆生物科技有限公司
• 主分類號: A61K39/395
• 分類號: A61K39/395;A61P1/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種治療仔豬腹瀉的卵黃抗體注射液，其特征在于在于：其包括從以PBoV和Kobu病毒二聯滅活疫苗免疫非免疫產蛋母雞后收集的免疫產蛋母雞雞蛋的卵黃中提取的卵黃抗體。

2.權利要求1所述的治療仔豬腹瀉的卵黃抗體注射液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)分離當前流行的PBoV和Kobu病毒，分別用豬腎原代細胞分離培養PBoV，用Vero細胞培養Kobu病毒，測定病毒滴度后制備成二聯滅活疫苗；

2)利用制備的二聯滅活疫苗免疫非免產蛋母雞；

3)第三次免疫后14天收集雞蛋，運用75％乙醇消毒蛋殼，在無菌條件下收集卵黃，運用等量磷酸鹽緩沖液(0.1M?PBS，PH7.2)后置組織勻漿器中，5000轉/分勻漿1分鐘，加入乳酸至PH為4.0，2～8℃攪拌過夜，置-80℃冷凍后解凍，并重復冷凍一次，然后8000轉/分離心10分鐘，收集上清，按照1∶1的比例加入飽和硫酸銨，2～8℃攪拌2消失，后2～8℃靜置過夜，8000轉/分離心10分鐘收集沉淀，加入0.1M?PBS溶解后除去硫酸銨；

4)運用微量中和實驗測定PBoV和Kobu病毒的中和抗體效價；

5)將效價測定好的卵黃抗體進行無菌檢驗，合格后無菌分裝，使PBoV和Kobu病毒抗體效價不低于1∶64。

3.權利要求2所述的治療仔豬腹瀉的卵黃抗體注射液的制備方法，其特征在于，步驟1)中：制備的疫苗中PBoV和Kobu病毒的TCID₅₀不低于10⁷/ml。

4.權利要求2或3所述的治療仔豬腹瀉的卵黃抗體注射液的制備方法，其特征在于，步驟2)中，免疫程序如下：與產蛋前30天首次免疫，免疫劑量為2ml/羽，首次免疫后2月、4月分別進行兩次加強免疫，免疫劑量為3ml/羽，此后每隔2月全群免疫一次，免疫劑量為2ml/羽，以誘導母雞持續性的產生抗PBoV和Kobu病毒的抗體。