[發(fā)明專利]對氯化鈉耐受的地衣芽孢桿菌的篩選方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110222042.6
• 申請日: 2011-08-04
• 公開（公告）號(hào): CN102344895A
• 公開（公告）日: 2012-02-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李寶成;尹川;馮作山;梁玉偉;解麗娟
• 申請（專利權(quán)）人: 雙贏集團(tuán)有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12R1/10
• 代理公司: 北京同輝知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11357
• 代理人: 劉洪勛;徐麗維

1.一種對氯化鈉耐受的地衣芽孢桿菌(Bacillus?licheniformis)的篩選方法，其特征在于包括如下過程：

(1)篩選：將地衣芽孢桿菌CGMCC?1.0518，以營養(yǎng)瓊脂為培養(yǎng)基，先進(jìn)行試管斜面培養(yǎng)，然后再進(jìn)行培養(yǎng)皿斜面劃線培養(yǎng)后篩選出典型的地衣芽孢桿菌的單菌落；將典型的地衣芽孢桿菌轉(zhuǎn)入營養(yǎng)瓊脂試管斜面，進(jìn)行培養(yǎng)；

(2)馴化：在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基里增加氯化鈉，制成氯化鈉濃度不同的培養(yǎng)皿，把步驟(1)中最后培養(yǎng)得到的地衣芽孢桿菌先在磷酸氨二銨濃度較低的培養(yǎng)皿中劃線培養(yǎng)；將培養(yǎng)的單菌落轉(zhuǎn)移到試管斜面培養(yǎng)后作為菌種，再在下一個(gè)氯化鈉濃度較高的培養(yǎng)皿中劃線培養(yǎng)，以此類推，逐步提高氯化鈉濃度，篩選出能夠耐受較高濃度氯化鈉的地衣芽孢桿菌。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟(2)中氯化鈉質(zhì)量濃度分別為2％、5％、8％、10％、12％、12.5％、13％和15％。

3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述營養(yǎng)瓊脂組成為：每1000ml水用蛋白胨10克、牛肉粉3.0克和氯化鈉5.0克，pH值為7.3±0.1。

4.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：各步驟中所述培養(yǎng)條件為在恒溫培養(yǎng)箱中34℃±0.5℃培養(yǎng)3-5天。