[發明專利]腸道病毒口服基因疫苗及其制備和應用

無效

• 申請號: 201110221964.5
• 申請日: 2011-08-04
• 公開（公告）號: CN102727908A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 貌盼勇;劉澤;胡燕;白冰珂;高蓉;沈宏輝;侯俊;王志杰;羅聲棟;柴艷濤
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第三〇二醫院;北京綠竹生物制藥有限公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K39/125;A61P31/14
• 代理公司: 北京北新智誠知識產權代理有限公司 11100
• 代理人: 劉徐紅

1.一種腸道病毒VP1基因疫苗，其特征在于：其包括真核細胞表達載體VR1012上插入核苷酸序列的腸道病毒VP1基因。

2.根據權利要求1所述的腸道病毒VP1基因疫苗，其特征在于：所述的腸道病毒VP1基因是腸道病毒71型VP1基因。

3.一種構建腸道病毒71型VP1基因疫苗的方法，其步驟如下：首先以含有腸道病毒71型VP1基因的質粒pT-EV71-3為模板，用PCR擴增出腸道病毒71型VP1基因序列，連入T-Easy載體，再通過雙酶切及再連接將目的基因連入真核表達載體VR1012，克隆篩選得到腸道病毒71型VP1基因疫苗質粒。

4.根據權利要求1所述的腸道病毒VP1基因疫苗，其特征在于：所述的腸道病毒VP1基因是柯薩奇病毒A16型VP1基因。

5.一種構建柯薩奇病毒A16型VP1基因疫苗的方法，其步驟如下：首先以含有柯薩奇病毒A16型VP1基因的質粒pT-CA16-TK1為模板，用PCR擴增出柯薩奇病毒A16型VP1基因序列，連入T-Easy載體，再通過雙酶切及再連接將目的基因連入真核表達載體VR1012，克隆篩選得到柯薩奇病毒A16型VP1基因疫苗質粒。

6.一種攜帶腸道病毒71型VP1基因的重組減毒傷寒沙門菌，其特征在于：其穩定攜帶腸道病毒71型VP1基因疫苗。

7.權利要求6所述的攜帶腸道病毒71型VP1基因的重組減毒傷寒沙門菌的構建方法，其步驟如下：使用電轉化儀，將腸道病毒71型VP1基因疫苗轉化至減毒傷寒沙門菌SL7207，克隆篩選得到穩定攜帶腸道病毒71型VP1基因疫苗質粒的重組減毒傷寒沙門菌。

8.一種攜帶柯薩奇病毒A16型VP1基因的重組減毒傷寒沙門菌，其特征在于：其穩定攜帶柯薩奇病毒A16型VP1基因疫苗。

9.權利要求8所述的攜帶柯薩奇病毒A16型VP1基因的重組減毒傷寒沙門菌的構建方法，其步驟如下：使用電轉化儀，將權利要求3所述的柯薩奇病毒A16型VP1基因疫苗轉化至減毒傷寒沙門菌SL7207，克隆篩選得到穩定攜帶柯薩奇病毒A16型VP1基因疫苗質粒的重組減毒傷寒沙門菌。

10.一種攜帶腸道病毒71型VP1基因的重組減毒傷寒沙門菌和一種攜帶柯薩奇病毒A16型VP1基因的重組減毒傷寒沙門菌，在治療和預防手足口疾病的藥物中的應用。