[發明專利]魚腥藍細菌2-酮基-肌醇脫氫酶基因及其應用無效
| 申請號： | 201110221829.0 | 申請日： | 2011-08-04 |
| 公開（公告）號： | CN102559711A | 公開（公告）日： | 2012-07-11 |
| 發明（設計）人： | 陳雯莉;汪方奎;支遙;王莉;張巨源 | 申請（專利權）人： | 華中農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/53 | 分類號： | C12N15/53;C12N9/04;C12N15/10;A01H5/00 |
| 代理公司： | 武漢開元知識產權代理有限公司 42104 | 代理人： | 王和平 |
| 地址： | 430070 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 魚腥藍 細菌 酮基 脫氫酶 基因 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.魚腥藍細菌2-酮基-肌醇脫氫酶基因，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。
2.權利要求1所述的魚腥藍細菌2-酮基-肌醇脫氫酶基因所編碼的多肽，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO：2所示。
3.根據權利要求1所述的魚腥藍細菌2-酮基-肌醇脫氫酶基因的克隆方法，其特征在于包括以下步驟：
(1)分離魚腥藍細菌總DNA；
(2)根據魚腥藍細菌的基因組序列，設計上下游引物：上游引物為GCCCATATGTTGGCAAAAAATGAG；下游引物為GCCCTCGAGGGAAATAGGTTATAAGTC，在上下游引物中分別引入Nde?I和XhoI核酸內切酶酶切位點；
(3)以魚腥藍細菌總DNA為模板，利用上下游引物進行PCR擴增，得到PCR產物；
(4)回收PCR產物；
(5)將PCR產物利用Nde?I和XhoI核酸內切酶連入克隆載體pBSpetE中，構建重組質粒；
(6)用重組質粒轉化大腸桿菌，進行培養、活化。
4.根據權利要求1所述的魚腥藍細菌2-酮基-肌醇脫氫酶基因在抗百草枯除草劑轉基因植物中的應用。
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