[發明專利]一種左卡尼汀中右旋異構體的檢測方法

有效

• 申請號: 201110220687.6
• 申請日: 2011-08-03
• 公開（公告）號: CN102359995A
• 公開（公告）日: 2012-02-22
• 發明（設計）人: 孟濤;馮文宇;婁玉濤;尤楠;金玉坤;尹宏;蘇貴弟;孟喆;周巖;唐奎山;刁恩德;劉愛泉
• 申請（專利權）人: 東北制藥集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 沈陽維特專利商標事務所(普通合伙) 21229
• 代理人: 甄玉荃

1.一種左卡尼汀中右旋異構體的檢測方法，其特征在于：該檢測方法包括 如下步驟：

(1)色譜條件：

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的C18柱，粒徑5μm；

檢測波長：激發光波長λex＝260nm，熒光波長λem＝315nm；

流動相：四正丁基氫氧化銨-甲醇和乙腈-水；

(2)四正丁基氫氧化銨溶劑的制備：

吸取24.4ml的55％的四正丁基氫氧化銨試劑，用水稀釋至1000ml，搖勻， 用磷酸調節pH至7.0；

(3)芴甲氧羰酰氯試劑的制備：

吸取1.0ml的0.5％芴甲氧羰酰氯試劑，加3ml的丙酮，混勻；

(4)系統適用性溶液的制備：

稱取混旋左卡尼汀對照品10mg，用四正丁基氫氧化銨溶劑溶解并稀釋至 50ml，搖勻；

(5)供試品溶液的制備：

稱取供試品約10mg，用四正丁基氫氧化銨溶劑溶解并稀釋至50ml，搖勻；

(6)衍生反應：

分別吸取供試品溶液、系統適用性溶液各0.1ml于容器中，再分別加0.4ml 芴甲氧羰酰氯試劑，置于80℃熱反應器中，放置20分鐘，取出冷卻至室溫，分 別加入8ml的四正丁基氫氧化銨-甲醇流動相；

(7)測定方法：

取系統適用性溶液的衍生反應液5μl注入液相色譜儀，重復6次，記錄圖 譜，左旋左卡尼汀保留時間為17.8分鐘，右旋左卡尼汀保留時間為14.5分鐘， 左旋左卡尼汀、右旋左卡尼汀的相對標準偏差均應≤2.0％，取供試液的衍生反 應液5μl注入液相色譜儀，記錄圖譜，分別計算供試液中左旋左卡尼汀的峰面 積和右旋左卡尼汀的峰面積。

2.根據權利要求1所述的一種左卡尼汀中右旋異構體的檢測方法，其特 征在于：所述四正丁基氫氧化銨-甲醇流動相中的四正丁基氫氧化銨溶液的配制 方法為，精密吸取2.4ml的55％的四正丁基氫氧化銨試劑，置于1000ml容量瓶 中，用水稀釋至刻度，搖勻。

3.根據權利要求1或2所述的一種左卡尼汀中右旋異構體的檢測方法， 其特征在于：所述流動相四正丁基氫氧化銨-甲醇配比為60∶40，pH值為3.0。

4.根據權利要求1所述的一種左卡尼汀中右旋異構體的檢測方法，其特 征在于：所述流動相乙腈-水的配比為65∶35，pH值為3.0。

5.根據權利要求1所述的一種左卡尼汀中右旋異構體的檢測方法，其特 征在于：所述檢測方法采用流動相四正丁基氫氧化銨-甲醇和乙腈-水濃度、流 速梯度淋洗法。

6.根據權利要求5所述的一種左卡尼汀中右旋異構體的檢測方法，其特 征在于：所述濃度、流速梯度淋洗法為如下步驟，洗脫開始后0-30分鐘，四正 丁基氫氧化銨-甲醇作為流動相，流速為0.75ml/分；洗脫開始后31-49分鐘， 乙腈-水作為流動相，流速為1.5ml/分；洗脫開始后50-55分鐘，四正丁基氫氧 化銨-甲醇作為流動相，流速為0.75ml/分。