[發明專利]一種羧甲基化黑木耳多糖、粗多糖及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201110219047.3
• 申請日: 2011-08-02
• 公開（公告）號: CN102321186A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 仰榴青;趙婷;吳向陽;魏紅;張敏;周葉;張冰濤
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A23L1/09
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

1.一種羧甲基化黑木耳多糖，其特征在于該多糖分子量為3.4×10⁶?Da；單糖組成為：甘露糖(man)?:?葡萄糖(glu)?=?1.06?:?1；該多糖以β-(1→3)-D-?man為主鏈，glu以取代基的形式鍵和于甘露糖的O-2和O-6位，糖殘基的C-2,?C-4?和C-6位由–CH₂COOH部分取代；該多糖溶解度為26?mg/mL。

2.一種羧甲基化黑木耳粗多糖，其特征在于其多糖得率為61.36%；羧甲基化取代度為0.857；溶解度為0.6?mg/mL。

3.權利要求1所述的一種羧甲基化黑木耳多糖的制備方法，其特征在于按照下述步驟進行：

⑴?黑木耳多糖的提取方法：

以料液比1:50-1:70，在溫度80-100℃水中提取2-4h，提取2次，合并上清液，上清液經濃縮后，加入乙醇醇沉，使得多糖的濃縮液中乙醇濃度為60-85%，所得沉淀離心、經冷凍干燥24-48h后得黑木耳粗多糖；

⑵?羧甲基化黑木耳多糖的制備：

取上述傳統水提醇沉所得黑木耳粗多糖，以料液比1:40加入異丙醇，室溫劇烈攪拌15min；在上述溶液中按照體積比40：7的比例逐滴加入質量濃度為20%?氫氧化鈉溶液，室溫下攪拌反應一定時間；再按照黑木耳粗多糖與氯乙酸質量比1：0.5-1.5的比例加入氯乙酸，于20-60℃恒溫水浴鍋中反應2-4?h；反應液用稀鹽酸中和至中性，經透析、濃縮和醇沉后即得羧甲基化黑木耳粗多糖；

⑶?取羧甲基化黑木耳粗多糖，用適量水溶解，離心除去不溶物，上清液通過DEAE-52離子交換柱進行分離；逐步以0-1?mol/L的NaCl溶液洗脫，用硫酸-苯酚法繪制洗脫曲線，根據洗脫曲線分別收取合并洗脫液，其中0.1mol/L?NaCl的洗脫液經濃縮、透析后，上葡聚糖凝膠柱，以0.1?mol/L?NaCl洗脫，根據洗脫曲線收取合并洗脫液，經濃縮、透析、凍干得羧甲基化黑木耳多糖。

4.權利要求2所述的一種羧甲基化黑木耳粗多糖的制備方法，其特征在于按照下述步驟進行：

⑴?黑木耳多糖的提取方法：

以料液比1:50-1:70，在溫度80-100℃水中提取2-4h，提取2次，合并上清液，上清液經濃縮后，加入乙醇醇沉，使得多糖的濃縮液中乙醇濃度為60-85%，所得沉淀離心、經冷凍干燥24-48h后得黑木耳粗多糖；

⑵?羧甲基化黑木耳多糖的制備：

取上述傳統水提醇沉所得黑木耳粗多糖，以料液比1:40加入異丙醇，室溫劇烈攪拌15min；在上述溶液中按照體積比40：7的比例逐滴加入質量濃度為20%?氫氧化鈉溶液，室溫下攪拌反應一定時間；再按照黑木耳粗多糖與氯乙酸質量比1：0.5-1.5的比例加入氯乙酸，于20-60℃恒溫水浴鍋中反應2-4?h；反應液用稀鹽酸中和至中性，經透析、濃縮和醇沉后即得羧甲基化黑木耳粗多糖。

5.權利要求1所述的一種羧甲基化黑木耳多糖作為抗氧化劑在功能食品和食品添加劑中的應用。

6.權利要求2所述的一種羧甲基化黑木耳粗多糖作為抗氧化劑在功能食品和食品添加劑中的應用。