[發(fā)明專利]利用高溫芽孢桿菌制備脂肽類生物表面活性劑的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110215321.X
• 申請(qǐng)日: 2011-07-29
• 公開（公告）號(hào): CN102399847A
• 公開（公告）日: 2012-04-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡志強(qiáng);楊廣花;朱孝霖;李亮;何玉財(cái);趙希岳;李爾煬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 常州大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P21/00
• 分類號(hào): C12P21/00;C12R1/07
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

1.利用高溫芽孢桿菌的制備脂肽類生物表面活性劑的方法，其特征在于按照下述步驟進(jìn)行：

（1）菌種發(fā)酵：將高溫芽孢桿菌LEY₁₁進(jìn)行發(fā)酵；接種量按體積比3～10%；發(fā)酵溫度為45℃~70℃，pH為6.5～8.0，轉(zhuǎn)速50～200rpm,通氣量2～8L/h，培養(yǎng)時(shí)間36～108h；

（2）分離提純：發(fā)酵液經(jīng)?8000~10000r/min離心10~20min去除菌體，上清液加入等體積的氯仿/甲醇(1~2/1~3,V/V)，萃取，取萃取液的下層液，50~70℃減壓蒸干得生物表面活性劑粗品，氯仿再次洗滌50~70℃蒸干得較純的生物表面活性劑產(chǎn)品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用高溫芽孢桿菌的制備脂肽類生物表面活性劑的方法，其特征在于其中所述的高溫芽孢桿菌LEY₁₁，該菌株已于2010年7月2日保藏于中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心，保藏編號(hào)為CGMCC?No.?3767。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用高溫芽孢桿菌的制備脂肽類生物表面活性劑的方法，其特征在于其中上述高溫芽孢菌LEY₁₁采用液體培養(yǎng)基，在發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)，產(chǎn)生脂肽類生物表面活劑，液體培養(yǎng)基含有碳源、氮源和無機(jī)鹽，碳源選自3%的葡萄糖、花生油、液體石蠟、可溶性淀粉、糊精、乳糖、酵母抽提物和0.1%的萘和正十六烷；氮源選自氨基酸、黃豆餅粉、蛋白胨、硝酸銨、硫酸銨、氯化銨，無機(jī)鹽主要是硫酸鎂(MgSO₄)、硫酸錳(MnSO₄·H₂O)、硫酸亞鐵(FeSO₄·7H₂O)、氯化鈣(CaCl₂·2H₂O)、磷酸氫二鉀(K₂HPO₄)、磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)，其中1000mL鹽溶液中含有；MgSO₄?19.5g；MnSO₄·H₂O?5g；FeSO₄·7H₂O?5g；CaCl₂·2H₂O?0.3g。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用高溫芽孢桿菌的制備脂肽類生物表面活性劑的方法，其特征在于其中所述的發(fā)酵培養(yǎng)基為花生油10~30mL、K₂HPO₄?5.0~5.7g；KH₂PO₄?1~1.7g；NH₄Cl??1.5~2.14g；鹽溶液?3~10mL；誘導(dǎo)因子正十六烷或萘為0.5~0.8g；配置1000?mL，其中1000mL鹽溶液中含有；MgSO₄?19.5g；MnSO₄·H₂O?5g；FeSO₄·7H₂O?5g；CaCl₂·2H₂O?0.3g。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的利用高溫芽孢桿菌的制備脂肽類生物表面活性劑的方法，其特征在于液體培養(yǎng)基每1000mL中含有：?花生油30mL或可溶性淀粉30g或正十六烷1g、K₂HPO₄?5.7g；KH₂PO₄?1.7g；NH₄Cl??2.14g；鹽溶液?10mL，其中1000mL鹽溶液中含有；MgSO₄?19.5g；MnSO₄·H₂O?5g；FeSO₄·7H₂O?5g；CaCl₂·2H₂O?0.3g。