[發明專利]一種廣東蟲草胞外多糖的生產方法

無效

• 申請號: 201110210935.9
• 申請日: 2011-07-26
• 公開（公告）號: CN102277397A
• 公開（公告）日: 2011-12-14
• 發明（設計）人: 林群英;宋斌;黃浩;李泰輝
• 申請（專利權）人: 廣東省微生物研究所
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12R1/645
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 潘偉健

技術領域

本發明涉及一種蟲草多糖的生產方法，具體來說涉及一種廣東蟲草胞外多糖的生產方法。

背景技術

蟲草屬(Cordyceps)隸屬于子囊菌門(Ascomycota)、肉座菌目(Hypocreales)、麥角菌科(Clavicipitaceae)，是最值得研究的真菌類群之一。現代科學研究表明，蟲草屬真菌是一類極具應用價值的藥食同源的大型真菌，其中尤以冬蟲夏草最為著名，其他種類如蛹蟲草(C.militaris(L.：Fr.)Link.)、蟬花(C.sobolifer(Hill)Berk.et?Br.)、古尼蟲草(C.gunnii(Berk.)Berk.)等都有類似于冬蟲夏草的作用，部分種類的活性成份甚至比冬蟲夏草還要高。其中的蟲草多糖具有抗菌、抗腫瘤、抗氧化和提高免疫力等多種功效，是重要的活性成分。

廣東蟲草(Cordyceps?guangdongensis?T.H.Li，Q.Y.Lin?&?B.Song)是中國特有蟲草新品種，目前已實現了人工培育，包括子實體和菌絲體的培育。研究證明，廣東蟲草多糖具有明顯的抗氧化功效，是可開發利用的理想材料。

發明內容

本發明的目的在于開發出廣東蟲草胞外多糖的生產方法。

我們通過將廣東蟲草母種在PDA培養基上培養得到斜面菌種，然后將斜面菌種在液體培養基中培養成一級菌種或進一步將一級菌種培養成二級菌種，再在生產培養基中培養，至析出胞外多糖，從而實現了本發明的目的。

本發明的廣東蟲草胞外多糖的生產方法，其特征包括以下步驟：

(1)將廣東蟲草(Cordyceps?guangdongensis?T.H.Li，Q.Y.Lin?&?B.Song)母種接種在PDA培養基上，20～25℃下暗培養20～30天，菌落直徑長至4～5cm時，得到斜面菌種；

(2)將步驟(1)得到的斜面菌種按每250mL培養基接入8～12塊黃豆大小菌塊的比例接種至液體培養基，20～28℃下，搖床轉速為120～180r/min，振蕩培養7～8天，至菌絲球充滿液體培養基，得到一級菌種，所述的液體培養基pH6.0～6.5，每升培養基由葡萄糖7～10g，蛋白胨3～6g，麥芽浸出物3～6g，酵母浸膏3～5g和余量的水組成；

(3)將步驟(2)得到的一級菌種按培養基體積5％～15％的接種量接種至生產液體培養基中，20～28℃下，搖床轉速為120～180r/min，通氣量10～25L/min，振蕩培養2～4天，至菌絲球充滿全部培養基，分離菌絲體和培養殘液，所述的生產液體培養基pH4～9，每升生產培養基由碳源10～40g、氮源6～14g和余量的水組成，所述的碳源是葡萄糖和/或麥芽浸出物，氮源是酵母浸膏和/或黃豆；

(4)在將步驟(3)得到的培養殘液中加入3～5倍體積的酒精，使酒精的終濃度為體積分數70％以上，4～6℃下靜置至析出胞外多糖，分離、干燥則可。

步驟(1)所述的廣東蟲草(Cordyceps?guangdongensis?T.H.Li，Q.Y.Lin?&?B.Song)即日本蟲草廣東變型(Cordyceps?japonica?f.guangdongensisT.H.Li，Q.Y.Lin?et?B.Song)GDIM_C050423?CCTCC?No.M206051。該蟲草菌株分離自廣東蟲草標本(GDGM?24020)，已于2006年5月16日保藏在中國典型培養物保藏中心，地址：中國，武漢，保藏號為CCTCC?No.M206051。該蟲草菌株首先公開在中國專利ZL200610035774.3中。日本蟲草廣東變型(Cordyceps?japonica?f.guangdongensis?T.H.Li，Q.Y.Lin?et?B.Song)GDIM_C050423于2008年發表的文獻中更名為廣東蟲草(Cordyceps?guangdongensis?T.H.Li，Q.Y.Lin?&B.Song)(見文獻：Lin?Q?Y，Li?T?H，Song?B.Mycotaxon，2008，103：371-376.)。

步驟(1)所述的PDA培養基即馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基，是食用菌領域常使用的培養基。

步驟(2)所述的一級菌種還可以進一步按培養基體積5％～15％的接種量在步驟(2)所述的液體培養基中以同樣的培養條件培養4～7天，至菌絲球充滿全部培養基，形成二級液體菌種，步驟(3)所述的一級菌種替換為二級菌種。