[發(fā)明專(zhuān)利]一種造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110210581.8
• 申請(qǐng)日: 2011-10-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102313660A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尤豐;黃暉;李元超;練健生;楊劍輝;周?chē)?guó)偉
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院南海海洋研究所
• 主分類(lèi)號(hào): G01N1/28
• 分類(lèi)號(hào): G01N1/28;G01N1/30;G01N1/36
• 代理公司: 廣州粵高專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 陳衛(wèi)

1.一種造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于包括如下步驟：（1）在海底采集含有造礁石珊瑚卵母細(xì)胞的健康珊瑚；（2）固定；（3）脫去造礁石珊瑚的鈣質(zhì)骨骼；（4）脫去組織中的水分；（5）將組織透明化；（6）將石蠟浸入組織為切片做準(zhǔn)備；（7）切片并修正；（8）將切片固定在載玻片上；（9）脫去切片上的石蠟；（10）染色；（11）脫水、封片。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于步驟（1）中所述造礁石珊瑚為直徑大于20cm的珊瑚塊，且無(wú)發(fā)白變色現(xiàn)象。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于步驟（2）中所述固定是用濃度為3.5~4.5%的海水甲醛固定。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于步驟（3）中所述脫去造礁石珊瑚的鈣質(zhì)骨骼是用45~55%的甲酸溶液脫鈣，脫鈣時(shí)間為24~48h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于步驟（4）中所述脫去組織中的水分是用乙醇按照從低濃度到高濃度的順序進(jìn)行脫水，依次為50%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、95%乙醇和無(wú)水乙醇，每次1~2h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于步驟（5）中將組織透明化是將組織在1:1的乙醇和二甲苯預(yù)混液中浸漬1~2h，再將組織放入100%二甲苯中浸漬25~35min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于步驟（8）所述將切片固定在載玻片上是先在載玻片上涂抹蛋白甘油，再將切片放在載玻片上鋪正，干燥。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于步驟（9）所述脫去切片上的石蠟是用二甲苯脫蠟。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于步驟（10）所述染色時(shí)使用蘇木精和伊紅進(jìn)行染色。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述造礁石珊瑚卵母細(xì)胞石蠟切片的制作方法，其特征在于步驟（11）所述脫水是用梯度酒精進(jìn)行脫水；所述封片是用中性樹(shù)脂進(jìn)行封片。