[發(fā)明專利]轉(zhuǎn)基因水稻品系Bar68-1的外源插入片段的旁側(cè)序列及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110206849.0
• 申請(qǐng)日: 2011-07-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102888398A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-01-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 金蕪軍;宛煜嵩;王文娟;張秀杰;苗朝華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 張慶敏

1.轉(zhuǎn)基因水稻品系Bar68-1的外源插入片段的旁側(cè)序列，所述旁側(cè)序列為3’端旁側(cè)序列，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，或與SEQ?ID?NO.1所示的序列同源性在99％以上的核苷酸序列。

2.轉(zhuǎn)基因水稻品系Bar68-1的外源插入片段的旁側(cè)序列，所述旁側(cè)序列為5’端旁側(cè)序列，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示，或與SEQ?ID?NO.2所示的序列同源性在99％以上的核苷酸序列。

3.制備權(quán)利要求1所述的旁側(cè)序列的方法，其是以轉(zhuǎn)基因水稻品系Bar68-1的基因組DNA為模板，通過(guò)hi?TAIL-PCR擴(kuò)增得到。

4.制備權(quán)利要求2所述的旁側(cè)序列的方法，其是以轉(zhuǎn)基因水稻品系Bar68-1的基因組DNA為模板，通過(guò)hi?TAIL-PCR和PCR擴(kuò)增得到。

5.采用權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的旁側(cè)序列設(shè)計(jì)特異性引物PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻品系Bar68-1的方法，其特征在于，所述特異性引物為：

正向引物Bar-F：5′-CCATATTCAGCTCGCCTTGC-3′和

反向引物Bar-R：5′-TGGTTTTTGTTGTCCGTGCCT-3′。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)提取植物基因組；

2)以步驟1)的基因組為模板，利用權(quán)利要求5的特異性引物進(jìn)行PCR檢測(cè)。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，PCR反應(yīng)條件為：94℃5min；94℃30s，58℃30s，72℃30s，35個(gè)循環(huán)；72℃7min。

8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法，其特征在于，PCR反應(yīng)體系為：

9.一種檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻品系Bar68-1的試劑盒，其特征在于，其包含以下引物：

正向引物Bar-F：5′-CCATATTCAGCTCGCCTTGC-3′和

反向引物Bar-R：5′-TGGTTTTTGTTGTCCGTGCCT-3′。

10.權(quán)利要求9所述的試劑盒在檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻品系Bar68-1中的應(yīng)用。