[發(fā)明專利]一種溶菌酶分子印跡-量子點納米熒光探針的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110204792.0
• 申請日: 2011-07-21
• 公開（公告）號: CN102313725A
• 公開（公告）日: 2012-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李文友;張衛(wèi);何錫文;張玉奎
• 申請（專利權(quán)）人: 南開大學(xué)
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;C09K11/88;C09K11/02
• 代理公司: 天津佳盟知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12002
• 代理人: 侯力

1.一種溶菌酶分子印跡-量子點納米熒光探針的制備方法，其特征在于：是以碲化鎘量子點為載體，溶菌酶(N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶)為模板分子，結(jié)合分子印跡技術(shù)的選擇性和量子點的熒光特性合成的納米熒光探針，包括如下步驟：

1)將碲粉(Te)、NaBH₄與蒸餾水混合，在氮氣保護并攪拌的條件下進行還原反應(yīng)制得NaHTe溶液，將制得的NaHTe溶液快速加入到巰基丙酸(MPA)的CdCl₂溶液中，用NaOH水溶液調(diào)節(jié)溶液的pH為9.0，然后沸水浴加熱所述溶液2h，即可制得碲化鎘量子點溶液；

2)將牛血清白蛋白溶于蒸餾水中，加入硼氫化鈉，攪拌1小時，然后在70℃水浴中加熱30分鐘，得到變性牛血清白蛋白(dBSA)溶液，將dBSA溶液加入到碲化鎘量子點溶液中，磁力攪拌24小時，得到dBSA包覆的量子點溶液；

3)在dBSA包覆的量子點溶液中依次加入模板分子溶菌酶、功能單體3-氨丙基三乙氧基丙烷、交聯(lián)劑正硅酸乙酯和氨水，室溫下磁力攪拌12小時，通過溶膠凝膠水解聚合反應(yīng)在量子點形成分子印跡層，即為探針；

4)用十二烷基硫酸鈉水溶液與探針混合，振蕩20-60分鐘，離心去除上清液，重新用上述十二烷基硫酸鈉溶液洗滌，重復(fù)此過程，直到用紫外分光光度計檢測模板分子洗凈為止，即可制得溶菌酶分子印跡-量子點納米熒光探針。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述溶菌酶分子印跡-量子點納米熒光探針的制備方法，其特征在于：所述NaBH₄與蒸餾水的用量比為45.5mg/mL，Te與NaBH₄的摩爾比為1∶19；所述MPA的CdCl₂溶液中MPA與CdCl₂的用量摩爾比為2.4∶1，Te^2-與MPA的摩爾比為1∶4.8。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述溶菌酶分子印跡-量子點納米熒光探針的制備方法，其特征在于：所述調(diào)節(jié)溶液pH的NaOH水溶液的濃度為1.0mol/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述溶菌酶分子印跡-量子點納米熒光探針的制備方法，其特征在于：所述牛血清白蛋白與蒸餾水的用量比為20-40mg/mL；牛血清白蛋白與硼氫化鈉的質(zhì)量比為100∶2-4，變性的牛血清白蛋白溶液與碲化鎘量子點溶液的體積比為1∶10。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述溶菌酶分子印跡-量子點納米熒光探針的制備方法，其特征在于：所述氨水質(zhì)量百分比濃度為25％，dBSA包覆的量子點溶液、溶菌酶、3-氨丙基三乙氧基丙烷、正硅酸乙酯與氨水的用量比為5mL∶10mg∶60μL∶100μL∶100μL。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述溶菌酶分子印跡-量子點納米熒光探針的制備方法，其特征在于：所述十二烷基硫酸鈉水溶液的質(zhì)量百分比濃度為0.5％，十二烷基硫酸鈉水溶液與探針混合的用量比為1ml/1mg。