[發明專利]一種毛栓菌及其產纖維素酶的方法無效
| 申請號: | 201110202609.3 | 申請日: | 2011-07-10 |
| 公開(公告)號: | CN102268379A | 公開(公告)日: | 2011-12-07 |
| 發明(設計)人: | 賈翠英;張玉輝;朱黎婭;趙俊杰;華承偉;趙婭珺 | 申請(專利權)人: | 賈翠英 |
| 主分類號: | C12N1/14 | 分類號: | C12N1/14;C12N9/42;C12R1/645 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 453003 河南省新*** | 國省代碼: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 毛栓菌 及其 纖維素酶 方法 | ||
1.一種毛栓菌(Trametes?trogii),菌株編號為Cellulase?1號,該菌株已于2011年5月12日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏號為CGMCC?No.4857。
2.根據權利要求1所述的毛栓菌Cellulase?1號菌株產纖維素酶的方法,其特征是將玉米芯或玉米秸稈或小麥秸稈粉碎過40目,稱量加入自來水配成2.5%~12.5%的發酵培養基,加入1%~10%淀粉或葡萄糖等可利用性碳源和0.1%~0.5%硫酸銨或蛋白胨或酵母膏等可利用性氮源,115℃高壓滅菌15~20min后,冷卻,無菌操作,接入在復篩培養基上已培養3~4天的Cellulase?1號菌株的菌餅適量,菌餅直徑為8mm~10mm,30℃~37℃靜置或兼性厭氧發酵3~4天,通風比1∶0.2~0.4,發酵結束,發酵液3000~3500rpm離心10~15min,得上清為粗酶液。
3.根據權利要求2所述的Cellulase?1號菌株產纖維素酶的方法,其特征是利用DNS法3,5-二硝基水楊酸法)測定CMC-Na酶活,即取適當稀釋的酶液1mL加入2mL?1%(w/v)的CMC-Na溶液(此溶液由pH=5.0的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液配置),50℃反應30min后加入2mLDNS溶液終止反應,沸水浴5min,流水冷卻,500nm處測定吸光值??瞻讓φ諡樵诩尤?mL酶液前,先加入2mL的DNS溶液終止反應,沸水浴5min,流水冷卻,然后測定500nm處的吸光值。
4.根據權利要求2所述的Cellulase?1號菌株產纖維素酶的方法,其特征是酶活定義為1mL粗酶液在1min分解底物產生1ug葡萄糖為1個酶活單位(U)。酶活計算方法為:酶活=稀釋的酶活測定值×1000×稀釋倍數/反應時間
5.根據權利要求2所述的Cellulase?1號菌株產纖維素酶的方法,其特征是所產CMC-Na酶酶活為75U/ml~110U?ml。
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