[發(fā)明專利]一種毛栓菌及其產(chǎn)纖維素酶的方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110202609.3 | 申請日： | 2011-07-10 |
| 公開（公告）號： | CN102268379A | 公開（公告）日： | 2011-12-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 賈翠英;張玉輝;朱黎婭;趙俊杰;華承偉;趙婭珺 | 申請（專利權(quán)）人： | 賈翠英 |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12N9/42;C12R1/645 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 453003 河南省新*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 毛栓菌 及其 纖維素酶 方法 | ||
1.一種毛栓菌(Trametes?trogii)，菌株編號為Cellulase?1號，該菌株已于2011年5月12日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC?No.4857。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛栓菌Cellulase?1號菌株產(chǎn)纖維素酶的方法，其特征是將玉米芯或玉米秸稈或小麥秸稈粉碎過40目，稱量加入自來水配成2.5％～12.5％的發(fā)酵培養(yǎng)基，加入1％～10％淀粉或葡萄糖等可利用性碳源和0.1％～0.5％硫酸銨或蛋白胨或酵母膏等可利用性氮源，115℃高壓滅菌15～20min后，冷卻，無菌操作，接入在復(fù)篩培養(yǎng)基上已培養(yǎng)3～4天的Cellulase?1號菌株的菌餅適量，菌餅直徑為8mm～10mm，30℃～37℃靜置或兼性厭氧發(fā)酵3～4天，通風比1∶0.2～0.4，發(fā)酵結(jié)束，發(fā)酵液3000～3500rpm離心10～15min，得上清為粗酶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的Cellulase?1號菌株產(chǎn)纖維素酶的方法，其特征是利用DNS法3，5-二硝基水楊酸法)測定CMC-Na酶活，即取適當稀釋的酶液1mL加入2mL?1％(w/v)的CMC-Na溶液(此溶液由pH＝5.0的磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液配置)，50℃反應(yīng)30min后加入2mLDNS溶液終止反應(yīng)，沸水浴5min，流水冷卻，500nm處測定吸光值。空白對照為在加入1mL酶液前，先加入2mL的DNS溶液終止反應(yīng)，沸水浴5min，流水冷卻，然后測定500nm處的吸光值。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的Cellulase?1號菌株產(chǎn)纖維素酶的方法，其特征是酶活定義為1mL粗酶液在1min分解底物產(chǎn)生1ug葡萄糖為1個酶活單位(U)。酶活計算方法為：酶活＝稀釋的酶活測定值×1000×稀釋倍數(shù)/反應(yīng)時間
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的Cellulase?1號菌株產(chǎn)纖維素酶的方法，其特征是所產(chǎn)CMC-Na酶酶活為75U/ml～110U?ml。
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