[發(fā)明專利]一種雙標記2-NP-AHD-(13C,15N2)的合成方法

有效

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• 申請日: 2011-07-19
• 公開（公告）號: CN102336713A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發(fā)明（設計）人: 徐建飛;杜曉寧;張彰;王偉
• 申請（專利權）人: 上海化工研究院
• 主分類號: C07D233/80
• 分類號: C07D233/80;C07B59/00
• 代理公司: 上海科盛知識產(chǎn)權代理有限公司 31225
• 代理人: 林君如

技術領域

本發(fā)明涉及穩(wěn)定同位素標記的有機化合物的制備方法，尤其是涉及一種雙標記2-NP-AHD-(¹³C，¹⁵N₂)的合成方法。

背景技術

呋喃妥因是硝基呋喃類抗菌藥物，主要用于腎炎、腎盂炎、膀胱炎、尿道炎等。由于價格低廉，所以應用廣泛。但是其具有潛在致癌和誘導有機體產(chǎn)生突變的性質。出于安全性考慮，世界上絕大多數(shù)國家包括中國、歐盟、美國等規(guī)定在動物食用組織中不允許有硝基呋喃類獸藥的殘留。如歐盟已于1995年禁止在食用動物中使用硝基呋喃類抗生素，并將其列為A類禁用藥物(EEC/1442/95和EEC/2901/93)，我國也于2002年頒布了禁止使用硝基呋喃類獸藥的禁令。

呋喃妥因在動物體內代謝速度快，半衰期短，難以檢出原藥殘留。代謝產(chǎn)物可穩(wěn)定存在數(shù)月，所以殘留檢測以代謝物作為指示該類藥物殘留的標識物。呋喃妥因的代謝物為AHD(1-氨基海因)。

為了使化合物在高噪音背景下，增加特征碎片離子的選擇性，提高質譜響應及其靈敏度，必須增加分子質量，所以采用2-硝基苯甲醛衍生化氨基增加代謝物的離子化效率。為了避免由于食品復雜的基質效應、前處理和質譜檢測器等因素對分析方法測定結果的影響，大部分獸藥殘留檢測方法均使用同位素內標，有效的校正了方法中出現(xiàn)的誤差，顯著提高了檢測方法的穩(wěn)定性。雙標記2-NP-AHD-(¹³C，¹⁵N₂)作為同位素內標物可以有效而且準確的檢測呋喃妥因的代謝物。

目前，合成AHD的方法有Norwich制藥公司(Brit.Patent?757822?to?Norwich?Pharmacal?Company，1954)以水合肼為原料制備，不足之處在于該法使用過量6倍的有毒水合肼，對環(huán)境和人體帶來了嚴重的危害，收率也只有35～40％；張瑞仁等(張瑞仁，王旭，王桂艷.1-氨基乙內酰脲的合成工藝改進[J].黑龍江醫(yī)藥科學.2006(5)：59)采用水合肼為原料，使用丙酮做保護基團，操作簡單，不足之處在于收率偏低(49％)。我們采用以雙標記氨基脲-(¹³C，¹⁵N₂)為原料，用苯甲醛對堿性較強的水合肼的兩個活潑氫加以保護，再與氯乙酸酯類化合物進行縮合反應，再用鹽酸水解，反應液直接和2-硝基苯甲醛反應，即可得到雙標記2-NP-AHD-(¹³C，¹⁵N₂)。該方法操作簡單，并且不需要提純AHD，直接參與下一步反應，提高收率至62％，并且同位素豐度不下降。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術存在的缺陷而提供一種可以有效而且準確的檢測呋喃妥因的代謝物AHD，提供了一種方法簡單、可行并適合批量生產(chǎn)的雙標記2-NP-AHD-(¹³C，¹⁵N₂)內標物的有機合成方法。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術方案來實現(xiàn)：

一種雙標記2-NP-AHD-(¹³C，¹⁵N₂)的合成方法，其特征在于，該方法以雙標記氨基脲-(¹³C，¹⁵N₂)為原料，經(jīng)過和苯甲醛反應，對堿性較強的水合肼的兩個活潑氫加以保護，再與氯乙酸酯類化合物進行縮合反應，再用鹽酸水解，反應液直接和2-硝基苯甲醛反應，即可得到雙標記2-NP-AHD-(¹³C，¹⁵N₂)。

反應路線如下：

注：*處為同位素標記。

雙標記2-NP-AHD-(¹³C，¹⁵N₂₎的合成方法具體包括以下步驟：

(1)將雙標記氨基脲-(¹³C，¹⁵N₂)溶于水溶液中，滴加到苯甲醛的乙醇溶液中，水浴反應后過濾，得到無色固體苯亞甲基縮氨基脲-(¹³C，¹⁵N₂)；