[發明專利]改良高特異性PCR方法無效
| 申請號： | 201110200385.2 | 申請日： | 2011-07-12 |
| 公開（公告）號： | CN102876659A | 公開（公告）日： | 2013-01-16 |
| 發明（設計）人： | 李彬 | 申請（專利權）人： | 李彬 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 050091 河北省石家莊*** | 國省代碼： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 改良 特異性 pcr 方法 | ||
【權利要求書】：
1.高特異性的改良PCR方法如下：
(1)將蠟丸同時加入dNTP，MgCl2，引物以及部分10×緩沖液，加熱80蠟丸融化，室溫冷卻，在表面形成一種蠟隔層
(2)在蠟隔層上加入DNA?Taq酶，DNA模板，以及部分10×緩沖液，進入PCR循環。
(3)PCR程序設計：將復性溫度初始值設置為70℃，每次下降1℃直至最適退火溫度，每個溫度循環2-4次。
(4)第三步完成以后，再在變性，復性，延伸，最適程序下進行30個循環左右。
(5)最后，72℃后延伸5-10min。
(6)最后在4℃下保存。
2.根據權利要求1所述的高特異性的改良PCR方法，其特征在于步驟(1)將蠟丸同時加入dNTP，MgCl2，引物以及部分10×緩沖液，加熱80蠟丸融化，室溫冷卻，在表面形成一種蠟隔層。
3.根據權利要求1所述的高特異性的改良PCR方法，其特征在于步驟(2)在蠟隔層上加入DNA?Taq酶，DNA模板，以及部分10×緩沖液，進入PCR循環。
4.根據權利要求1所述的高特異性的改良PCR方法，其特征在于步驟(3)PCR程序設計：將復性溫度初始值設置為70℃，每次下降1℃直至最適退火溫度，每個溫度循環2-4次。
5.根據權利要求1所述的高特異性的改良PCR方法，其特征在于步驟(4)第三步完成以后，再在變性，復性，延伸，最適程序下進行30個循環左右。
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