[發明專利]鴨瘟病毒 gG截段重組蛋白及其制備方法有效
| 申請號： | 201110177128.1 | 申請日： | 2011-06-28 |
| 公開（公告）號： | CN102250224A | 公開（公告）日： | 2011-11-23 |
| 發明（設計）人： | 程安春;楊曉圓;汪銘書;陳孝躍 | 申請（專利權）人： | 四川農業大學實驗動物工程技術中心 |
| 主分類號： | C07K14/03 | 分類號： | C07K14/03;C07K1/22;C12N15/38;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275 | 代理人： | 趙榮之 |
| 地址： | 625014 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 瘟病 gg 重組 蛋白 及其 制備 方法 | ||
1.鴨瘟病毒?gG截段重組蛋白，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。
2.根據權利要求1所述的鴨瘟病毒?gG截段重組蛋白，其特征在于：其DNA序列如SEQ?ID?NO:2?所示。
3.權利要求1所述的鴨瘟病毒?gG截段重組蛋白的制備方法，其特征在于：
A、以DPV基因組DNA為模板，采用核苷酸序列分別如SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4所示的上、下游引物PCR擴增得鴨瘟病毒?gG截段基因片段，與pMD18-T?的連接，得pMD18-gGM;
B、限制性內切酶BamHⅠ和XhoⅠ分別雙酶切pMD18-gGM質粒和原核表達載體pET32a(+),并連接,?得重組原核表達質粒pET32a-gGM;
C、并將上述提取的重組質粒pET32a-gGM轉化到表達宿主菌誘導表達,得鴨瘟病毒?gG截段重組蛋白粗品。
4.根據權利要求3所述的鴨瘟病毒?gG截段重組蛋白的制備方法，其特征在于：將步驟C所得鴨瘟病毒?gG截段重組蛋白粗品經鎳瓊脂糖凝膠親和層析純化后，得鴨瘟病毒?gG截段重組蛋白。
5.根據權利要求3所述的鴨瘟病毒?gG截段重組蛋白的制備方法，其特征在于：步驟C中的宿主菌為菌株BL21(DE3)，在IPTG濃度≥0.2mmol/L,誘導溫度為30℃條件下進行誘導表達2小時，得鴨瘟病毒?gG截段重組蛋白。
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