[發明專利]快速檢測肌鈣蛋白I的膠體金試紙及其制備方法

有效

• 申請號: 201110174611.4
• 申請日: 2011-06-24
• 公開（公告）號: CN102841208A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發明（設計）人: 余占江;胡光宇;王長青;張芳
• 申請（專利權）人: 北京樂普醫療科技有限責任公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/532
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王加嶺;張慶敏

1.一種快速檢測心肌肌鈣蛋白I膠體金試紙條，其包括包被膜、噴涂有膠體金標記的抗心肌肌鈣蛋白I單克隆抗體的膠體金墊1、噴涂有膠體金標記的抗BSA單克隆抗體或抗PEG單克隆抗體的膠體金墊2、樣品墊、吸水墊和底板，所述的包被膜涂覆有抗心肌肌鈣蛋白I單克隆抗體檢測線和兔抗鼠抗體質控線。

2.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述的膠體金墊1噴涂有粒徑為10nm～100nm的膠體金標記的抗心肌肌鈣蛋白I單克隆抗體。

3.根據權利要求2所述的試紙條，其特征在于，所述的膠體金標記的抗心肌肌鈣蛋白I單克隆抗體用BSA或PEG封閉。

4.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述的膠體金墊2噴涂有粒徑為20nm～100nm的膠體金標記的抗BSA單克隆抗體或抗PEG單克隆抗體。

5.根據權利要求1～4任一項所述的試紙條，其特征在于，所述的包被膜為硝酸纖維素膜。

6.根據權利要求1～4任一項所述的試紙條，其特征在于，所述的膠體金墊1、膠體金墊2和樣品墊為聚酯膜或玻璃纖維素膜。

7.權利要求1～6任一項所述的試紙條的制備方法，包括如下步驟：

1)制備膠體金墊1：將BSA或PEG封閉的膠體金標記的抗心肌肌鈣蛋白I抗體溶液噴灑于聚酯膜或玻璃纖維素膜上，烘干備用；

2)制備膠體金墊2：將膠體金標記的抗BSA單克隆抗體溶液或抗PEG溶液噴灑于聚酯膜或玻璃纖維素膜上，烘干備用；

3)制備包被膜：將抗心肌肌鈣蛋白I抗體稀釋液和兔抗鼠抗體稀釋液噴涂于硝酸纖維素膜上，烘干備用；

4)將樣品墊用樣品墊溶液處理后烘干備用；

5)底板上依次相互交錯地粘上制備的樣品墊、金標墊1、金標墊2、包被膜、和吸水墊，然后在上面覆蓋透明塑料密封膜得到試紙。

8.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于，膠體金標墊1的制備方法為：用碳酸鉀調節顆粒粒徑10nm～100nm膠體金溶液的pH值至7.0～8.0，加入1～50μg抗心肌肌鈣蛋白I單克隆抗體，室溫攪拌10～60min后，加入終濃度0.01％～1％的PEG20000溶液或者0.1％～5％的BSA溶液終止，冷凍離心后，用pH5.0～pH6.5，含0.01％～5％PEG20000的0.01～0.5M硼酸鹽緩沖液或pH7.0～8.0，含0.01％～1％PEG20000的0.01～0.5M磷酸鹽緩沖液清洗后再次離心，加入pH6.5～8.0，含0.01～3％BSA，0.01～1％PEG20000、1～8％蔗糖的0.01～0.5M磷酸鹽緩沖液復溶后，使用Biodot三維噴點平臺將復溶液以1～5μL/cm的速度噴灑于聚酯膜或玻璃纖維素膜上，于25～40℃烘干8～24小時。

9.根據權利要求7所述的制備方法，其特征在于，膠體金墊2的制備方法是：用碳酸鉀調節顆粒粒徑10nm～100nm膠體金溶液的pH值至7.0～8.0，加入1～50μg抗BSA單克隆抗體或者1～50μg抗PEG單克隆抗體，室溫攪拌10～60min后，加入終濃度0.01％～1％的PEG20000溶液或者0.1％～5％的BSA溶液終止，冷凍離心后，用pH5.0～pH6.5，含0.01％～5％PEG20000的0.01～0.5M硼酸鹽緩沖液或pH7.0～8.0，含0.01％～1％PEG20000的0.01～0.5M磷酸鹽緩沖液清洗后再次離心，加入pH6.5～8.0，含0.01～3％BSA，0.01～1％PEG20000、1～8％蔗糖的0.01～0.5M磷酸鹽緩沖液復溶后，使用Biodot三維噴點平臺將復溶液以1～5μL/cm的速度噴灑于聚酯膜或玻璃纖維素膜上，于25～40℃烘干8～24小時。

10.權利要求1～6任一項所述的試紙條在檢測肌鈣蛋白I中的應用。