[發(fā)明專利]TL固定化酶及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110170701.6
• 申請日: 2011-06-23
• 公開（公告）號: CN102839166A
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭妍;辛本榮;楊天奎;徐學(xué)兵
• 申請（專利權(quán)）人: 豐益(上海)生物技術(shù)研發(fā)中心有限公司
• 主分類號: C12N11/08
• 分類號: C12N11/08;C12P7/64
• 代理公司: 上海專利商標事務(wù)所有限公司 31100
• 代理人: 楊昀

1.一種制備固定化脂肪酶的方法，所述方法包括步驟：

a)對載體進行前處理，所述載體選自：離子交換樹脂或骨架為聚苯乙烯的大孔吸附樹脂；

b)提供脂肪酶，并任選在其中加入酶蛋白交聯(lián)劑；

c)將步驟a)中所得的經(jīng)前處理的載體與步驟b)中所提供的脂肪酶接觸，使所述脂肪酶固定于所述經(jīng)前處理的載體；

d)干燥步驟c)中所得的固定有脂肪酶的載體，以獲得所述固定化脂肪酶。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述載體選自：極性大孔吸附樹脂、非極性大孔吸附樹脂、陽離子交換樹脂或陰離子交換樹脂。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，

所述非極性大孔吸附樹脂選自：D101、HPD100A、AmberliteXAD-4、HPD100、HPD300、HPD700、X-5、XAD-4或HP20；

所述極性大孔吸附樹脂選自：D201、LSA-10或Amberlite?XAD7HP；

所述陽離子交換樹脂選自：D113、D001或Ambetlite?IRC50；

所述陰離子交換樹脂選自：D301或Styrene-DVB201×2。

4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，

所述大孔吸附樹脂的前處理是如下進行的：將載體置于水中浸泡去雜，然后用溶劑浸泡1～24h以去除有機雜質(zhì)和不溶物，再用水洗去所述溶劑，其中所述溶劑為：乙醇、正己烷、丙酮或石油醚；

所述離子交換樹脂的前處理是如下進行的：用0.05mol/L～lmol/L的堿液和酸液交替浸泡或沖洗所述樹脂1-5次，然后僅用0.05mol/L～lmol/L的堿液再次浸泡或沖洗樹脂1次，再用水洗至水呈中性。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b)中所提供的脂肪酶選自：嗜熱絲孢菌(Thermomyces?Lanuginosus)的發(fā)酵產(chǎn)物；通過基因工程或蛋白質(zhì)工程改造而得的脂肪酶；或市售的脂肪酶。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述脂肪酶未經(jīng)任何前處理而用于步驟c)中。

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶蛋白交聯(lián)劑選自：戊二醛溶液、聚乙烯亞胺、聚丙烯亞胺、聚乙烯胺、明膠或精胺。

8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟c)中，所述經(jīng)處理的載體與脂肪酶以g/ml計的重量/體積比為25∶1～1∶25。

9.一種固定化脂肪酶或其包裝產(chǎn)品，其特征在于，所述的固定化脂肪酶是通過權(quán)利要求1-8中任一項所述的方法制備的。

10.一種進行酯交換、酯化、酸解或醇解反應(yīng)的方法，所述方法包括使用權(quán)利要求9所述的固定化脂肪酶作為催化劑。