[發(fā)明專(zhuān)利]比伐盧定的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110170669.1
• 申請(qǐng)日: 2011-06-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102286076A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-12-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 文永均;謝期林;王曉莉;郭德文;曾德志
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 成都圣諾科技發(fā)展有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K7/08
• 分類(lèi)號(hào): C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所 51124
• 代理人: 羅麗;武森濤

1.比伐盧定的制備方法，包括固相多肽合成法制備比伐盧定樹(shù)脂、比伐盧定樹(shù)脂酸解得到比伐盧定粗品、比伐盧定粗品純化得到比伐盧定純品，其中固相多肽合成法制備比伐盧定樹(shù)脂的方法為：在Fmoc-Leu-載體樹(shù)脂上通過(guò)固相偶聯(lián)合成法依次接入下列序列中相對(duì)應(yīng)的Fmoc-保護(hù)氨基酸，得到比伐盧定樹(shù)脂：

R₁-D-Phe-Pro-Arg(Pbf)-Pro-X-Asn(R₂)-Gly-Asp(OtBu)-

Phe-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-Ile-Pro-Glu(OtBu)-Glu(OtBu)-

Tyr(tBu)-Leu-樹(shù)脂

其中，X為Gly-Gly-Gly-Gly，R₁為R₃或H，R₂為T(mén)rt或H，R₃為Fmoc或Boc；接入X片段時(shí)僅用1次固相偶聯(lián)合成反應(yīng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：所述載體樹(shù)脂的取代值為0.5～1.5mmol/g，優(yōu)選的為0.8～1.2mmol/g。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：所述載體樹(shù)脂為T(mén)rityl-Cl類(lèi)型樹(shù)脂或羥基類(lèi)型樹(shù)脂。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：Trityl-Cl類(lèi)型樹(shù)脂為T(mén)rityl-Cl樹(shù)脂、4-Methyltrityl-Cl樹(shù)脂、4-Methoxytrityl-Cl樹(shù)脂或2-Cl?Trity-Cl樹(shù)脂；羥基類(lèi)型樹(shù)脂為Wang樹(shù)脂或?qū)αu甲基苯氧甲基聚苯乙烯樹(shù)脂。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：當(dāng)載體樹(shù)脂為三苯甲基氯樹(shù)脂時(shí)，F(xiàn)moc-Leu-OH與載體樹(shù)脂的偶聯(lián)方法為：Fmoc-Leu-OH的羧基與樹(shù)脂中的Cl-代烷在堿作用下發(fā)生酯化反應(yīng)而接入保護(hù)氨基酸。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：所述的堿選自N.N-二異丙基乙基胺、三乙胺、吡啶中的至少一種。

7.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：當(dāng)載體樹(shù)脂為羥基類(lèi)型樹(shù)脂時(shí)，F(xiàn)moc-Leu-OH與載體樹(shù)脂的偶聯(lián)方法為：Fmoc-Leu-OH的羧基與樹(shù)脂中的羥基在偶聯(lián)劑、活化劑和堿催化劑的作用下發(fā)生酯化反應(yīng)而接入保護(hù)氨基酸。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：偶聯(lián)劑選自N，N-二異丙基碳二亞胺、N，N-二環(huán)己基碳二亞胺、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷、2-(7-氮雜-1H-苯并三氮唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽、O-苯并三氮唑-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸酯中的至少一種；

堿催化劑為4-N，N-二甲基吡啶；

活化劑選自1-羥基苯并三唑、N-羥基-7-氮雜苯并三氮唑中的至少一種。

9.根據(jù)權(quán)利要求1～8任一項(xiàng)所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：所述Fmoc-保護(hù)氨基酸種類(lèi)分別為：R₃-D-Phe-OH、Fmoc-X-OH、Fmoc-Asn(R₂)-OH、Fmoc-Arg(pbf)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH，其中，X為Gly-Gly-Gly-Gly，R₂為T(mén)rt或H，R₃為Fmoc或Boc。

10.根據(jù)權(quán)利要求1～8任一項(xiàng)所述的比伐盧定的制備方法，其特征在于：比伐盧定樹(shù)脂經(jīng)酸解同時(shí)脫去樹(shù)脂及側(cè)鏈保護(hù)基得到比伐盧定粗品：

D-Phe-Pro-Arg-Pro-Y-Asn-Gly-Asp-Phe-

Glu-Glu-Ile-Pro-Glu-Glu-Tyr-Leu-OH

其中，Y為Gly-Gly-Gly-Gly；

酸解試劑為三氟醋酸、1，2-乙二硫醇和水的混合溶劑，其用量為每克樹(shù)脂4～15ml；酸解試劑混合溶劑的配比為：TFA的體積比為80～95％，EDT的體積比為1～10％，余量為水。