[發(fā)明專利]一種用于檢測原料乳及乳制品中β-內(nèi)酰胺酶的檢測裝置及其檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110162413.6
• 申請日: 2011-06-16
• 公開（公告）號: CN102221547A
• 公開（公告）日: 2011-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 謝巖黎;韓小賢;林敏剛;張鑫瀟;李雪琴;姚永志
• 申請（專利權(quán)）人: 河南工業(yè)大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N33/52
• 代理公司: 鄭州科維專利代理有限公司 41102
• 代理人: 張欣棠;馬忠

1.一種用于檢測原料乳及乳制品中β-內(nèi)酰胺酶的裝置，其特征在于：包括檢測試紙條和β-內(nèi)酰胺酶標準比色卡；所述的檢測試紙由過濾層(1)、顯色層(2)、吸水材料層(3)和基板(4)組成，過濾層(1)、顯色層(2)、吸水材料層(3)粘貼在基板(4)上，且同時依次連接；其中所述的β-內(nèi)酰胺酶標準比色卡由9個色塊(5)組成，從淺到深對應(yīng)于β-內(nèi)酰胺酶濃度梯度分別為0U/mL、6U/mL、12U/mL、25U/mL、50U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測原料乳及乳制品中β-內(nèi)酰胺酶的裝置，其特征在于：所述的檢測試紙條過濾層(1)用玻璃棉制成，顯色層(2)由醋酸纖維素膜制成，吸水層(3)由中性濾紙制成，基板(4)由PVC薄片制成。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種用于檢測原料乳及乳制品中β-內(nèi)酰胺酶的裝置，其特征在于：所述顯色層（2）的厚度為0.1～1mm，其制備步驟如下：配置0.5～1.0?%?2,2'-聯(lián)喹啉乙醇溶液和0.1~0.3mol/L?CuSO₄溶液，混合均勻后，將醋酸纖維素膜浸入上述混合溶液5~10min后取出，放入真空干燥箱內(nèi)40～80℃干燥20～50min，然后組裝成檢測試紙條。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測原料乳及乳制品中β-內(nèi)酰胺酶的裝置，其特征在于：所述β-內(nèi)酰胺酶標準比色卡的具體制備步驟如下：

(1)配制青霉素底物濃度為5000U/mL的溶液9份，分別加入濃度為0U/mL、6U/mL、12U/mL、25U/mL、50U/mL、100U/mL、150U/mL、200U/mL、250U/mL?β-內(nèi)酰胺酶標準溶液，混合均勻后37℃水浴60min；

(2)取出后加入5mL?10%~15%TCA，4000rpm離心10min，然后取制備的檢測試紙條浸入上清液5min，進行顯色反應(yīng)；

(3)依據(jù)不同濃度的β-內(nèi)酰胺酶標準液酶解液在試紙上的顯色結(jié)果，制作標準色塊，將標準色塊按β-內(nèi)酰胺酶標準品的濃度依次排列，粘貼，制得標準比色卡。

5.根據(jù)權(quán)利1或4所述的β-內(nèi)酰胺酶標準比色卡，在特征在于：根據(jù)測色儀測量試紙顯色的色度值，利用顏色模塊軟件對色彩數(shù)據(jù)進行模擬，制作標準比色塊；或者利用計算機Adobe?Photoshop編輯不同顏色的RGB值，編輯出與標準β-內(nèi)酰胺酶濃度顯色相匹配的顏色，制備出標準色塊；按β-內(nèi)酰胺酶標準溶液顯色排列、粘貼，制成β-內(nèi)酰胺酶標準比色卡。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測原料乳及乳制品中β-內(nèi)酰胺酶的裝置，其特征在于，用上述裝置檢測原料乳及乳制品中β-內(nèi)酰胺酶的測定方法為：取原料乳或乳制品按1:1比例添加10%~15%的TCA，倒入離心管中，混合均勻后放入離心機，4000rpm離心10min，上清液備用；取β-內(nèi)酰胺酶檢測試紙條，浸入上述待測樣品上清液進行顯色反應(yīng)5min，與β-內(nèi)酰胺酶標準比色卡對照，即得到β-內(nèi)酰胺酶的濃度范圍。