[發(fā)明專利]長(zhǎng)春新堿納米靶向緩釋長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體及制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110161829.6
• 申請(qǐng)日: 2011-06-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102225053A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-10-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 常津;王生;蘇文雅;王漢杰;康世胤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K9/127
• 分類號(hào): A61K9/127;A61K31/475;A61K47/36;A61P35/00
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 12201
• 代理人: 王麗

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種長(zhǎng)春新堿納米靶向緩釋長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體及制備方法，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

長(zhǎng)春新堿為夾竹桃科植物長(zhǎng)春花中提取的有效成分。抗腫瘤作用靶點(diǎn)是微管，主要抑制微管蛋白的聚合而影響紡錘體微管的形成，使有絲分裂停止于中期。還可干擾蛋白質(zhì)代謝及抑制RNA多聚酶的活力，并抑制細(xì)胞膜類脂質(zhì)的合成和氨基酸在細(xì)胞膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)。長(zhǎng)春新堿對(duì)急性白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、惡性淋巴瘤、生殖細(xì)胞腫瘤、小細(xì)胞肺癌、尤文肉瘤、腎母細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、乳腺癌、慢性淋巴細(xì)胞白血病、消化道癌、黑色素瘤及多發(fā)性骨髓瘤等療效顯著。長(zhǎng)春新堿雖然抗腫瘤作用良好，但毒副作用大，主要是神經(jīng)毒性，因而極大的限制了其臨床應(yīng)用。長(zhǎng)春新堿脂質(zhì)體為現(xiàn)在的熱點(diǎn)研究方向，用來(lái)降低長(zhǎng)春新堿的神經(jīng)毒性。

脂質(zhì)體是目前降低藥物毒性常見(jiàn)的制劑手段之一，但是以傳統(tǒng)的卵磷脂、膽固醇制備的常規(guī)脂質(zhì)體在體內(nèi)多被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(reticuloendothelial?system，RES)吞噬，在血液循環(huán)中駐留時(shí)間較短。并且其物理化學(xué)穩(wěn)定性差，儲(chǔ)存和應(yīng)用過(guò)程中容易發(fā)生融合聚集，包封藥物容易泄漏；官能團(tuán)少，不易進(jìn)行多功能化修飾等。近年來(lái)，開(kāi)發(fā)新型脂質(zhì)體的研究受到廣泛關(guān)注。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于長(zhǎng)春新堿在腫瘤治療上的存在的缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種長(zhǎng)春新堿納米靶向緩釋長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體及其制備方法。這種高分子脂質(zhì)體表面含有聚乙二醇及葉酸，聚乙二醇可減少脂質(zhì)體被人體網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)捕捉，使其具有體內(nèi)長(zhǎng)循環(huán)性能；由于在多種腫瘤細(xì)胞(如卵巢癌、結(jié)腸直腸癌、肺癌、腎細(xì)胞癌等)膜表面葉酸受體高度表達(dá)，故制備的表面富含葉酸的高分子脂質(zhì)體具有腫瘤靶向性能；制備的高分子脂質(zhì)體緩釋時(shí)間長(zhǎng)，載藥率高，穩(wěn)定性好，可提高藥物的利用效率，降低由于藥物突釋造成的毒性；同時(shí)由于這種高分子脂質(zhì)體粒徑小，具有穿過(guò)靶組織內(nèi)皮細(xì)胞的能力，可以被腫瘤細(xì)胞攝取進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，將所包含的長(zhǎng)春新堿在細(xì)胞內(nèi)釋放，從而大大提高藥物的利用效率。

本發(fā)明利用分別經(jīng)聚乙二醇(PEG)和葉酸(FA)修飾的雙親性殼聚糖衍生物賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽(OQLCS)與膽固醇通過(guò)反相蒸發(fā)法或薄膜分散法制備出一種長(zhǎng)春新堿納米靶向緩釋長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體。如圖2的粒徑分析測(cè)試結(jié)果所示，其有效粒徑在50～200nm之間。如圖1透射圖片所示，其粒徑均勻，分散性好，很少發(fā)生團(tuán)聚現(xiàn)象。

具體技術(shù)方案如下：

本發(fā)明的一種長(zhǎng)春新堿納米靶向緩釋長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體，其所使用雙親性高分子為聚乙二醇修飾的賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽(PEG-OQLCS)和葉酸修飾的賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽(FA-OQLCS)，其粒徑在50～200nm之間，粒徑均勻，表面含有聚乙二醇及葉酸修飾。

本發(fā)明的長(zhǎng)春新堿納米靶向緩釋長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體的制備方法，其原料質(zhì)量份數(shù)比配比為：

葉酸修飾的賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽FA-OQLCS∶聚乙二醇修飾的賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽PEG-OQLCS∶長(zhǎng)春新堿＝1∶1～2∶0.5～1；FA-OQLCS與PEG-OQLCS總量∶膽固醇＝4～2∶1；

采用反相蒸發(fā)法時(shí)，制備步驟如下：

a.將長(zhǎng)春新堿溶于蒸餾水中，形成水相，待用；

b.將聚乙二醇修飾的賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽、葉酸修飾的賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽、膽固醇，溶于二氯甲烷中，形成油相，油相與步驟a)中水相體積比為1∶2～3；

c.將水相在50～200w功率范圍下進(jìn)行超聲，加入油相，超聲形成水油均勻的分散乳液；

d.將步驟c)乳液在30～50℃下于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行旋蒸，同時(shí)向旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中通入氮?dú)饬骷右员Ｗo(hù)，當(dāng)有機(jī)溶劑完全揮發(fā)后，即得到高分子脂質(zhì)體。

本發(fā)明可以將反相蒸發(fā)法改用薄膜分散法時(shí)，制備步驟如下：

a.將聚乙二醇修飾的賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽、葉酸修飾的賴氨酸殼聚糖十八烷基季銨鹽和膽固醇溶于二氯甲烷中；

b.將步驟a)混合物置于反應(yīng)器中，在30～50℃下于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行旋蒸，同時(shí)向旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中通入氮?dú)饬骷右员Ｗo(hù)，使反應(yīng)器中的有機(jī)溶劑完全揮發(fā)；

c.將長(zhǎng)春新堿溶于蒸餾水中，加入步驟b)的反應(yīng)器中，將脂質(zhì)膜水化，然后用超聲波清洗器進(jìn)行超聲分散，即得到高分子脂質(zhì)體。

上述的FA-OQLCS和PEG-OQLCS可以采用任何方法制備的都可以，也可以采用市售的，也可以采用如下方法制備：