[發(fā)明專(zhuān)利]一種檢測(cè)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞免疫抑制功能的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110161298.0
• 申請(qǐng)日: 2011-06-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102288587A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-12-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 顧鵬
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 顧鵬
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/64
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/64;C12Q1/02
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種檢測(cè)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞免疫抑制功能的方法，其中該方法步驟包括：

1)純化CD4⁺T細(xì)胞并用PBS磷酸鹽緩沖液洗滌；

2)10⁷CD4⁺T細(xì)胞重懸于500μl預(yù)熱的PBS磷酸鹽緩沖液中；

3)加入等體積CFSE羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂，預(yù)熱PBS磷酸鹽緩沖液5μM，CFSE羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂終濃度為2.5μM；

4)室溫孵育2分鐘；

5)加入等體積的胎牛血清，室溫孵育1分鐘；

6)完全培養(yǎng)基洗滌3次，重新計(jì)數(shù)，加入96孔板培養(yǎng)5天；

7)加入調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，第5天時(shí)根據(jù)CFSE羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂的強(qiáng)弱檢測(cè)其對(duì)反應(yīng)細(xì)胞的抑制能力。

2.如權(quán)利要求1所述的檢測(cè)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞免疫抑制功能的方法，其特征在于：所述室溫孵育為避光條件。