[發明專利]一種檢測調節性T細胞免疫抑制功能的方法無效
| 申請號: | 201110161298.0 | 申請日: | 2011-06-15 |
| 公開(公告)號: | CN102288587A | 公開(公告)日: | 2011-12-21 |
| 發明(設計)人: | 顧鵬 | 申請(專利權)人: | 顧鵬 |
| 主分類號: | G01N21/64 | 分類號: | G01N21/64;C12Q1/02 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 200025 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 檢測 調節 細胞 免疫抑制 功能 方法 | ||
1.一種檢測調節性T細胞免疫抑制功能的方法,其中該方法步驟包括:
1)純化CD4+T細胞并用PBS磷酸鹽緩沖液洗滌;
2)107CD4+T細胞重懸于500μl預熱的PBS磷酸鹽緩沖液中;
3)加入等體積CFSE羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂,預熱PBS磷酸鹽緩沖液5μM,CFSE羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂終濃度為2.5μM;
4)室溫孵育2分鐘;
5)加入等體積的胎牛血清,室溫孵育1分鐘;
6)完全培養基洗滌3次,重新計數,加入96孔板培養5天;
7)加入調節性T細胞,第5天時根據CFSE羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂的強弱檢測其對反應細胞的抑制能力。
2.如權利要求1所述的檢測調節性T細胞免疫抑制功能的方法,其特征在于:所述室溫孵育為避光條件。
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