[發明專利]使骨髓間充質干細胞靶向于心肌梗死灶的試劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201110153645.5
• 申請日: 2011-06-09
• 公開（公告）號: CN102228472A
• 公開（公告）日: 2011-11-02
• 發明（設計）人: 李戍;焦陽;焦守恕;曹衛
• 申請（專利權）人: 無錫人寰生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;C12N5/0775;A61P9/10
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;任鳳華

技術領域

本發明涉及一種使骨髓間充質干細胞靶向于心肌梗死灶的試劑及其制備方法。

背景技術

雖然各種治療方法不斷在進步，心血管疾病仍然是導致死亡的一個主要原因。在發達國家，缺血性心臟病導致的死亡占由心血管疾病引起的死亡的50％以上。據美國國家健康和營養調查2005-2006年的數據，1/3或近80,000,000的美國成年人患有一種或多種心血管疾病，其中大約有38,100,000人年齡在60或60歲以上。死亡資料顯示2005年美國以心血管疾病(包括先天性心血管缺陷)為潛在原因引起的死亡人數為864,480，占總死亡人數2,448,017的35.3％，或者說每2.8個死亡人數中有一個是以心血管疾病為潛在原因而死的。2005年心血管疾病的總死亡人數(1,372,000)大約占了所有死亡人數的56％。大約每天有2,400美國人死于心血管疾病，即每30秒就有一個人死于心血管疾病。每年死于心血管疾病的人幾乎與死于癌癥、慢性下呼吸道疾病、意外和糖尿病的人一樣多(NCHS)。

干細胞移植有可能修復和改善心臟狀況，從而極大地幫助降低疾病的發生率和死亡率。Dib等人證實了自體成肌細胞移植的可行性、安全性和患者的成功生存，并指出干細胞移植可能是治療末期心臟病的一個潛在的治療方法。

同種異體骨髓間充質細胞可以從骨髓中分離出來。它們可以通過培養大量增殖同時保持其多種潛能特性。它們是組織工程使用的初級細胞，可以表達多種細胞類型，組織工程是一個非常有前途有希望的領域，它讓我們可以重建器官，修復病變和受損的組織。

同種異體骨髓間充質細胞主要有兩種：造血骨髓干細胞(單核)和骨髓間充質干細胞。人們用后肢缺血再灌注模型進行研究，對這兩種干細胞進行了深刻的對比。間充質干細胞有更強的修復作用，因為它們分泌更多與血管生成有關的細胞因子。間充質干細胞有多向分化潛能，能逃過受體免疫系統的檢查，甚至能降低T細胞的反應，這使我們可以使用多種異體干細胞進行治療。

目前所記載的研究大部分都將干細胞注射到冠狀動脈內和肌肉內。一個有698位病人的研究分析顯示使用冠狀動脈內注射干細胞治療急性心肌梗塞對于恢復心臟功能和心臟變形能達到相關的臨床效果。使用細胞治療的病人其目標血管重建的需求并沒有增加，研究發現治療是安全的。雖然乍一看，冠狀動脈內注射是細胞應用的一種方式，但放射標記骨髓細胞顯示：與肌肉內注射相比，冠狀動脈內注射所留下的細胞量較少。但肌肉內注射只能對局部區域起作用。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種使骨髓間充質干細胞靶向于心肌梗死灶的試劑。

本發明所提供的使骨髓間充質干細胞靶向于心肌梗死灶的試劑，由使骨髓間充質干細胞靶向于心肌梗死灶的培養基和離體的骨髓間充質干細胞組成；所述使骨髓間充質干細胞靶向于心肌梗死灶的培養基，由溶質和溶劑組成，所述溶質由如下終濃度的七種物質組成：葡萄糖4.0g/L-5.0g/L，碳酸鈉0.11g/L-0.19g/L，L-谷氨酰胺0.584g/L-0.702g/L，二甲基亞砜100ml/L-130ml/L，轉鐵蛋白50g/L-67g/L，胰島素5g/L-6.6g/L，堿性成纖維細胞生長因子0.01g/L-0.05g/L，所述溶劑為注射用水。所述溶質具體可由如下終濃度的七種物質組成：葡萄糖4.5g/L，碳酸鈉0.11g/L，L-谷氨酰胺0.584g/L，二甲基亞砜100ml/L，轉鐵蛋白50g/L，胰島素5g/L，堿性成纖維細胞生長因子0.01g/L。

其中，所述轉鐵蛋白可為人轉鐵蛋白，所述胰島素可為人胰島素，所述堿性成纖維細胞生長因子可為人堿性成纖維細胞生長因子，所述骨髓間充質干細胞可為人骨髓間充質干細胞。

所述培養基和所述離體的骨髓間充質干細胞的配比可為每毫升培養基10⁶-10⁸個所述骨髓間充質干細胞，具體可為每毫升培養基10⁷個所述離體的骨髓間充質干細胞，如每毫升培養基(1.0×10⁷-1.5×10⁷)個所述離體的骨髓間充質干細胞。

所述離體的人骨髓間充質干細胞具體可為離體的人同種異體骨髓間充質干細胞。

所述使骨髓間充質干細胞靶向于心肌梗死灶的試劑，可按照包括如下步驟的方法制備：將所述離體的骨髓間充質干細胞和所述使骨髓間充質干細胞靶向于心肌梗死灶的培養基混合，得到所述的試劑。