[發(fā)明專利]使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向于心肌梗死灶的試劑及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110153645.5 | 申請日: | 2011-06-09 |
| 公開(公告)號: | CN102228472A | 公開(公告)日: | 2011-11-02 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 李戍;焦陽;焦守恕;曹衛(wèi) | 申請(專利權(quán))人: | 無錫人寰生物醫(yī)藥科技有限公司 |
| 主分類號: | A61K35/28 | 分類號: | A61K35/28;C12N5/0775;A61P9/10 |
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| 地址: | 214174 江蘇省無錫*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 骨髓 間充質(zhì) 干細(xì)胞 靶向 心肌梗死 試劑 及其 制備 方法 | ||
1.使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向于心肌梗死灶的試劑,由使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向于心肌梗死灶的培養(yǎng)基和離體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞組成;所述使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向于心肌梗死灶的培養(yǎng)基,由溶質(zhì)和溶劑組成;
所述溶質(zhì)由如下終濃度的七種物質(zhì)組成:葡萄糖4.0g/L-5.0g/L,碳酸鈉0.11g/L-0.19g/L,L-谷氨酰胺0.584g/L-0.702g/L,二甲基亞砜100ml/L-130ml/L,轉(zhuǎn)鐵蛋白50g/L-67g/L,胰島素5g/L-6.6g/L,堿性成纖維細(xì)胞生長因子0.01g/L-0.05g/L;所述溶劑為注射用水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑,其特征在于:所述溶質(zhì)由如下終濃度的七種物質(zhì)組成:葡萄糖4.5g/L,碳酸鈉0.11g/L,L-谷氨酰胺0.584g/L,二甲基亞砜100ml/L,轉(zhuǎn)鐵蛋白50g/L,胰島素5g/L,堿性成纖維細(xì)胞生長因子0.01g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的試劑,其特征在于:所述轉(zhuǎn)鐵蛋白為人轉(zhuǎn)鐵蛋白,所述胰島素為人胰島素,所述堿性成纖維細(xì)胞生長因子為人堿性成纖維細(xì)胞生長因子,所述離體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為離體的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;所述培養(yǎng)基和所述骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的配比為每升培養(yǎng)基106-108個(gè)所述骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的試劑,其特征在于:所述離體的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為離體的人同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;所述培養(yǎng)基和所述離體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的配比為每升培養(yǎng)基(1.0×107-1.5×107)個(gè)所述離體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。
5.使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向于心肌梗死灶的成套試劑,包括權(quán)利要求1-4中任一所述的試劑、細(xì)胞稀釋液和細(xì)胞染液;所述細(xì)胞染液能區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞;所述細(xì)胞稀釋液為注射用生理鹽水。
6.使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向于心肌梗死灶的成套試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括權(quán)利要求5所述的成套試劑、細(xì)胞計(jì)數(shù)板、用于存放權(quán)利要求1-4中任一所述的試劑的瓶A、用于存放所述細(xì)胞染液的瓶B和用于存放所述細(xì)胞稀釋液的瓶C。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的成套試劑盒,其特征在于:所述成套試劑盒還包括用于吸取細(xì)胞懸液的吸管和用于將所述細(xì)胞懸液放入所述細(xì)胞計(jì)數(shù)板的虹吸管。
8.權(quán)利要求1-4中任一所述的試劑的制備方法,包括如下步驟:將所述離體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和所述使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向于心肌梗死灶的培養(yǎng)基混合,得到權(quán)利要求1-4中任一所述的試劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于:所述離體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和所述使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向于心肌梗死灶的培養(yǎng)基按照106-108個(gè)所述離體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞1L所述使骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞靶向于心肌梗死灶的培養(yǎng)基的比例混合。
10.權(quán)利要求6-8中任一所述的成套試劑盒的制備方法,包括如下步驟:將權(quán)利要求1-4中任一所述的試劑單獨(dú)包裝于一個(gè)試劑盒;將權(quán)利要求5所述的細(xì)胞染液和權(quán)利要求5所述的細(xì)胞稀釋液分別獨(dú)立包裝后,與權(quán)利要求7所述的吸管和虹吸管共同包裝于另一個(gè)試劑盒內(nèi),得到由兩個(gè)試劑盒組成的所述成套試劑盒。
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