[發(fā)明專利]一種篩選、識別干細胞的試劑盒及其應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110149665.5
• 申請日: 2011-05-25
• 公開（公告）號: CN102796700A
• 公開（公告）日: 2012-11-28
• 發(fā)明（設計）人: 李福生;盧磊磊;盧淼淼;盧晶晶
• 申請（專利權）人: 李福生;盧磊磊
• 主分類號: C12N5/074
• 分類號: C12N5/074;C12N5/095;G01N33/53;C12Q1/02;A61L27/38;A61K35/12;A61K35/24;A61K35/42
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種篩選、識別干細胞的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：

1)篩選試劑；

2)細胞洗滌液；

3)識別試劑；

4)細胞因子組合；

5)描述使用方法的說明書，以及任選的；

6)混合容器和裝置。

其中，所述篩選試劑選擇包括抗生素化療藥物、抗代謝化療藥物、烷化劑化療藥物、激素及內(nèi)分泌化療藥物、植物化療藥物、亞硝脲類化療藥物、抗體阻斷劑化療藥物、門冬酰胺酶、甲基芐肼、草酸鉑、鉑類、丙亞胺、羥基脲和氨烯咪胺的一種或兩種以上的組合。

其中，所述識別試劑選擇BrdU、氚標記胸腺嘧啶核苷(³H-TdR)、5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷(EDU)和其他可標記所述干細胞群或細胞系或其子代的任一分子或物質。

2.根據(jù)權利要求1所述的篩選、識別干細胞的試劑盒，其特征在于，所述化療藥物的濃度約1mg/kg-100mg/kg細胞重量，且所述化療藥物作用細胞群的時間范圍為0.1h-72h，或選擇使用所述的化療藥物的濃度約10mg/kg-50mg/kg細胞重量，且所述化療藥物作用細胞群的時間范圍為0.5h-36h。

3.根據(jù)權利要求1所述的篩選、識別干細胞的試劑盒，其特征在于，所述識別試劑使用的濃度約0.1mg/kg-15mg/kg細胞重量，所述標記作用于所述篩選后干細胞群的時間為0.01h-96h。

4.根據(jù)權利要求1所述的篩選、識別干細胞的試劑盒，其特征在于，所述化療藥物選擇以抗代謝化療藥物、烷化劑化療藥物、抗生素化療藥物、植物化療藥物聯(lián)合鉑類化療藥物任一一種的組合。

5.根據(jù)權利要求1所述的篩選、識別干細胞的試劑盒，其特征在于，所述細胞洗滌試液可為生理鹽水、PBS、或其他緩沖液。

6.根據(jù)權利要求1所述的篩選、識別干細胞的試劑盒，其特征在于，所述細胞因子選擇EGF、B27、bEGF、N2、Heparin、LIF為基礎的細胞因子組合，其中所述EGF終濃度為5ng/mL-100ng/mL，優(yōu)選10ng/mL-50ng/mL，所述bFGF終濃度為5ng/mL-100ng/mL，優(yōu)選10ng/mL-50ng/mL，所述Heparin終濃度為2μg/mL-40μg/mL，所述B27、N2終濃度分別為2ng/mL-50ng/mL，優(yōu)選10ng/mL-30ng/mL，所述LIF(白血病抑制因子)終濃度為100U/mL-1500U/mL，優(yōu)選500U/mL-1000U/mL。

7.根據(jù)權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的標記干細胞攜帶的標記也可選擇為磁性氧化鐵標記、量子點標記、GFP標記、RFP標記或其他任何可以讓所述篩選的干細胞和或子代攜帶的標記。