[發明專利]一種長春氟寧脂質體制劑及其制備方法

無效

• 申請號: 201110149433.X
• 申請日: 2011-06-03
• 公開（公告）號: CN102805729A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 王晶翼;楊清敏;王棟海;鄒偉偉;張明會
• 申請（專利權）人: 齊魯制藥有限公司
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K31/475;A61K47/34;A61P35/00
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 苗奎

1.一種長春氟寧的脂質體制劑，主要包含藥物長春氟寧、磷脂、膽固醇和聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG-DSPE)，其中，

聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺與磷脂的質量比為0.05～0.5∶1；優選的PEG-DSPE與磷脂的質量比為0.1～0.5∶1；

膽固醇與磷脂的質量比為0.1～0.5∶1，優選膽固醇與磷脂的質量比為0.2～0.3∶1；

以長春氟寧計，藥物與磷脂的質量比為1∶3～20，所述藥物包封于由磷脂雙分子層組成的脂質體內部及磷脂雙分子層中。

2.如權利要求1所述的長春氟寧的脂質體制劑，其特征在于所述藥物長春氟寧為重酒石酸長春氟寧。

3.如權利要求1或2所述的長春氟寧的脂質體制劑，其特征在于所述的磷脂選自二硬脂酸磷脂酰膽堿、二棕櫚酸磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、氫化大豆磷脂、蛋黃磷脂、大豆磷脂或鞘磷脂。

4.如權利要求1或2所述的長春氟寧的脂質體制劑，其特征在于是注射液制劑或凍干制劑。

5.如權利要求4所述的長春氟寧的脂質體制劑，其特征在于，所述的注射液制劑，每1000ml制劑中含有：重酒石酸長春氟寧1g-20g，磷脂3g-400g，聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺1.5g-200g，膽固醇0.3g-200g。

6.如權利要求4所述的長春氟寧的脂質體制劑，其特征在于，所述的凍干制劑，凍干前每1000ml制劑中含有：重酒石酸長春氟寧1g-20g，磷脂為重酒石酸長春氟寧質量的5-15倍，PEG-DSPE與磷脂的質量比為0.1～0.4∶1；膽固醇與磷脂的質量比為0.2～0.3∶1；凍干保護劑為凍干前液體制劑質量的5-20％。

7.權利要求1～6所述長春氟寧脂質體制劑的制備方法，包括如下步驟：

a、空白脂質體的制備

(1)按配方稱取磷脂、聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺以及膽固醇溶于適量有機溶劑中，充分溶解；

(2)配制含有銨鹽的水溶液或緩沖鹽的pH為3.0-6.0的緩沖液，并將其加入至上述步驟(1)制得的溶液中，在40-70℃溫度條件下攪拌反應10-60分鐘，得到多室脂質體；

(3)采用高壓均質、擠出、超聲或凍融的方法將步驟(2)得到的多室脂質體的平均粒徑降低至80-500nm，即得到空白脂質體；

b、梯度脂質體溶液的制備

按現有技術將步驟a制得的空白脂質體制成具有脂質體內、外離子梯度的體系或脂質體內、外質子梯度的體系，使得脂質體外水相的pH值高于脂質體內部pH值，或者使得脂質體外水相中的銨鹽去除從而形成脂質體內外部銨離子梯度；

c、載藥

將步驟b得到的梯度脂質體溶液置于30-60℃水浴中溫浴，取處方量藥物長春氟寧溶液加于脂質體溶液中，30-60℃攪拌5-60分鐘，即可得到長春氟寧脂質體溶液；

d、去除外水相游離藥物

采用透析法、超濾法或凝膠柱層析法將步驟c得到的長春氟寧脂質體溶液中未包封的游離藥物去除；

e、步驟d所得溶液過濾除菌后即得到長春氟寧長循環脂質體注射液制劑；

繼續以下步驟制備長春氟寧長循環脂質體凍干制劑：

f、步驟e得到的長春氟寧長循環脂質體注射液中加入凍干保護劑，按現有技術進行凍干，得凍干制劑；凍干保護劑選自蔗糖、麥芽糖、海藻糖、乳糖、半乳糖、葡萄糖或甘露醇之一或組合；凍干保護劑的量占凍干前液體制劑質量的5-20％。

8.如權利要求7所述的制備方法，其特征在于步驟a中所述的有機溶劑選自無水乙醇、叔丁醇、乙醚、二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇或乙酸乙酯，其中優選無水乙醇；進一步優選有機溶劑的加入量與磷脂的質量比為1∶5～20。

9.如權利要求7所述的制備方法，其特征在于步驟a中所述的銨鹽選自蔗糖八硫酸酯銨、硫酸銨、醋酸銨、氯化銨或乙二胺四乙酸銨；優選的，所述銨鹽的濃度為50-500mM；所述的緩沖液選自枸櫞酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液或碳酸鹽緩沖液；優選的，所述緩沖鹽的濃度為50-500mM。

10.如權利要求7所述的制備方法，其特征在于，采用以下方法之一：

①脂質體膜材為氫化大豆磷脂、膽固醇及聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，質量比1-5∶1∶0.5-1，以適量乙醇溶解，加入硫酸銨溶液200-300mmol·L^-1，50-70℃水浴水化30-60分鐘，高壓均質、擠出或超聲處理降低粒徑至100-300nm，然后采用0.22μm微孔濾膜過濾除菌，除去外水相硫酸銨，得硫酸銨梯度脂質體；將重酒石酸長春氟寧生理鹽水溶液加入此梯度脂質體中，重酒石酸長春氟寧含量為氫化大豆磷脂含量的10％-50％；30-60℃水浴保溫載藥20-40分鐘，除菌過濾，并去除外水相游離藥物后制得長春氟寧脂質體；

②脂質體膜材為氫化大豆磷脂、膽固醇及聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，質量比5-10∶1∶0.1-0.5，以適量乙醇溶解，加入枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液200-300mmol·L^-1，pH3.0-6.0，50-70℃水浴水化10-60分鐘，得到空白脂質體初品；高壓均質、擠出、超聲或凍融處理降低粒徑至50-300nm，然后采用0.22μm微孔濾膜除菌，得空白脂質體；取空白脂質體混懸液10.0mL，加入200-300mmol·L^-1磷酸鈉溶液，混合，隨后加入重酒石酸長春氟寧，重酒石酸長春氟寧含量為氫化大豆磷脂含量的20％-40％；40-60℃保溫5-60分鐘，除菌過濾，并去除外水相游離藥物后制得長春氟寧脂質體；

③脂質體膜材為氫化大豆磷脂、膽固醇及聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，質量比10-20∶1∶0.01-0.1，以適量乙醇溶解，加入乙二胺四乙酸銨100-300mmol·L^-1，pH4-6.0，40-70℃水浴水化20-60分鐘，高壓均質、凍融、擠出或超聲處理降低粒徑至100-200nm，然后采用0.22μm微孔濾膜過濾除菌，透析除去外水相乙二胺四乙酸銨，得乙二胺四乙酸銨梯度脂質體；將重酒石酸長春氟寧加入此梯度脂質體中，重酒石酸長春氟寧含量為氫化大豆

磷脂含量的10％-40％；30-60℃水浴保溫載藥5-40分鐘，除菌過濾，并去除外水相游離藥物后制得長春氟寧脂質體；

④脂質體膜材為氫化大豆磷脂、膽固醇及聚乙二醇化的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，質量比5-15∶1∶0.5-1，以適量乙醇溶解，加入含蔗糖八硫酸酯銨鹽的溶液，50-70℃水浴水化10-60分鐘，高壓均質、擠出、超聲、凍融等處理降低粒徑至80～200nm，超濾除去外水相蔗糖八硫酸酯銨鹽，得梯度脂質體，將重酒石酸長春氟寧加入此梯度脂質體中，重酒石酸長春氟寧含量為氫化大豆磷脂含量的20％-30％；30-60℃水浴保溫載藥5-60分鐘，除菌過濾，并去除外水相游離藥物后制得長春氟寧脂質體。