[發(fā)明專利]利用減毒傷寒沙門菌遞送的HBV-熱休克蛋白70融合基因疫苗及制法和應(yīng)用無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110149193.3 | 申請日： | 2011-06-03 |
| 公開（公告）號： | CN102805872A | 公開（公告）日： | 2012-12-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 貌盼勇;劉澤;辛紹杰;胡燕;白冰珂;沈宏輝;高蓉;侯俊;王志杰;羅聲棟;柴艷濤 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國人民解放軍第三〇二醫(yī)院;北京綠竹生物制藥有限公司 |
| 主分類號： | A61K48/00 | 分類號： | A61K48/00;A61K39/29;C12N15/31;C12N15/51;C12N15/52;C12N15/79;A61P1/16;A61P31/20 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 利用 傷寒 沙門 遞送 hbv 休克 蛋白 70 融合 基因 疫苗 制法 應(yīng)用 | ||
1.一種HBV突變型preC/C基因疫苗，其包括HBV突變型preC/C基因，該目的基因的真核細(xì)胞表達(dá)載體為VR1012。
2.一種構(gòu)建HBV突變型preC/C基因疫苗的方法，其步驟如下：首先以含有HBV突變型preC/C基因的質(zhì)粒VEC4為模板，用PCR擴(kuò)增出HBV突變型preC/C基因序列，無終止密碼子，連入T-Easy載體，再通過雙酶切及再連接將目的基因連入真核表達(dá)載體VR1012，克隆篩選得到HBV突變型preC/C基因疫苗無終止密碼子質(zhì)粒。
3.一種HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70融合基因疫苗，其特征在于：其包括HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70融合基因，該目的基因的真核細(xì)胞表達(dá)載體為VR1012。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70融合基因疫苗，其特征在于：所述的HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70融合基因是HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70羧基端融合基因或HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70T細(xì)胞表位融合基因。
5.權(quán)利要求4所述的HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70融合基因疫苗的構(gòu)建方法，其步驟如下：首先以含有HBV突變型preC/C基因的質(zhì)粒VEC4為模板，用PCR擴(kuò)增出HBV突變型preC/C基因序列，無終止密碼子，連入T-Easy載體，再通過雙酶切及再連接將目的基因連入真核表達(dá)載體VR1012，克隆篩選得到HBV突變型preC/C基因疫苗無終止密碼子質(zhì)粒；再以含有分枝桿菌熱休克蛋白70基因的質(zhì)粒pT-HSP70為模板，PCR擴(kuò)增熱休克蛋白70羧基端基因或熱休克蛋白70T細(xì)胞表位基因，連入T-Easy載體，再通過雙酶切及再連接將目的基因連入HBV突變型preC/C基因疫苗無終止密碼子質(zhì)粒，克隆篩選得到HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70羧基端融合基因疫苗質(zhì)粒或HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70T細(xì)胞表位融合基因疫苗質(zhì)粒。
6.一種攜帶HBV突變型preC/C基因的重組減毒傷寒沙門菌，其特征在于：其穩(wěn)定攜帶HBV突變型preC/C基因疫苗。
7.權(quán)利要求6所述的攜帶HBV突變型preC/C基因的重組減毒傷寒沙門菌的構(gòu)建方法，其步驟如下：使用電轉(zhuǎn)化儀，將HBV突變型preC/C基因疫苗轉(zhuǎn)化至減毒傷寒沙門菌，克隆篩選得到穩(wěn)定攜帶HBV突變型preC/C基因疫苗的重組減毒傷寒沙門菌。
8.一種攜帶HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70融合基因的重組減毒傷寒沙門菌，其特征在于：其穩(wěn)定攜帶HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70羧基端融合基因疫苗或HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70T細(xì)胞表位融合基因疫苗。
9.權(quán)利要求8所述的攜帶HBV突變型preC/C基因的重組減毒傷寒沙門菌的構(gòu)建方法，其步驟如下：使用電轉(zhuǎn)化儀，將HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70羧基端融合基因疫苗或HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70T細(xì)胞表位融合基因疫苗轉(zhuǎn)化至減毒傷寒沙門菌，克隆篩選得到穩(wěn)定攜帶HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70羧基端融合基因疫苗或HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70T細(xì)胞表位融合基因疫苗的重組減毒傷寒沙門菌。
10.一種攜帶HBV突變型preC/C基因的重組減毒傷寒沙門菌、一種攜帶HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70羧基端融合基因的重組減毒傷寒沙門菌和一種攜帶HBV突變型preC/C-熱休克蛋白70T細(xì)胞表位融合基因的重組減毒傷寒沙門菌在制備治療和預(yù)防乙型肝炎的藥物中的應(yīng)用。
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