[發明專利]用雙指示線免疫層析半定量診斷甲胎蛋白的方法

無效

• 申請號: 201110148727.0
• 申請日: 2011-06-03
• 公開（公告）號: CN102323425A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 霍五奎;岳曉燕;馬雪明;劉寅;王晶;羅云萍;張有青
• 申請（專利權）人: 正元盛邦(天津)生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/574;G01N33/558
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1.一種用雙指示線免疫層析半定量診斷甲胎蛋白的方法，其特征在于，采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒，標記抗AFP單克隆抗體1并均勻涂布于膠體金墊上，作為示蹤標記物。在硝酸纖維素膜上，兩個不同濃度的AFP單克隆抗體2固定于兩個檢測線(即T線)，羊抗鼠二抗固定于質控線(即C線)。依次將樣本墊、膠金墊、硝酸纖維素膜和吸水濾紙組裝，剪成膠體金試紙并裝入檢測卡中。金標抗體與相應的抗原、抗體發生特異性結合被截留而顯色，根據T線、C線顯色與否來判斷陰陽性結果。

2.根據權利要求1所述的一種用雙指示線免疫層析半定量診斷甲胎蛋白的方法，其特征在于，抗體劃線濃度為：

T1線用濃度為0.2mg/mL的AFP單克隆抗體2劃線，用于檢出20ng/mL的AFP；

T2線用濃度為0.1mg/mL的AFP單克隆抗體2劃線，用于檢出400ng/mL的AFP；

C線用3.5mg/mL羊抗鼠多克隆載體劃線；

將硝酸纖維素膜置于40℃烘箱干燥3天。

3.根據權利要求1所述的一種用雙指示線免疫層析半定量診斷甲胎蛋白的方法，其特征在于，運用不同濃度的抗體溶液在相同的基質上劃線，以膠體金方法檢測多個不同濃度水平物質的方法。