[發明專利]適用于作物SSR分子標記分析的基因組DNA提取方法

有效

• 申請號: 201110144544.1
• 申請日: 2011-05-31
• 公開（公告）號: CN102220313A
• 公開（公告）日: 2011-10-19
• 發明（設計）人: 梁俊;李楊瑞;陳忠良;莫磊興;吳凱朝;范業賡;王天順;牙禹;廖潔;魏源文;鄧智年;莫璋紅
• 申請（專利權）人: 廣西作物遺傳改良生物技術重點開放實驗室;農業部甘蔗品質監督檢驗測試中心（南寧）
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王加嶺;張慶敏

1.一種適用于作物SSR分子標記分析的基因組DNA提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)向葉片中加入DNA提取緩沖液，蛋白酶K和核糖核酸酶，振蕩混勻；

2)將上述混合體系置于37℃，30min；68℃，20min；37℃，30min；然后于4℃保存；

3)將步驟2)中得到的混合體系冰浴5-10min；

4)將步驟3)中得到的混合體系離心，得上清。

2.根據權利要求1所述的基因組DNA提取方法，其特征在于，步驟1)具體為：向0.02～0.04cm²的葉片中加入50～100μL?DNA提取緩沖液，0.2～0.4μL的100mg/mL蛋白酶K和1～2μL的10mg/mL核糖核酸酶，振蕩混勻10～20sec；

其中，DNA提取緩沖液的成份為10mmol/L?Tris-HCl，1mmol/LEDTA，0.1％SDS，pH值8.0。

3.根據權利要求2所述的基因組DNA提取方法，其特征在于，步驟1)具體為：向0.02～0.04cm²的葉片中加入50μL?DNA提取緩沖液，0.2μL的100mg/mL蛋白酶K和1μL的10mg/mL核糖核酸酶，振蕩混勻10sec。

4.根據權利要求1所述的基因組DNA提取方法，其特征在于，步驟2)為混合體系置于PCR擴增儀中進行反應。

5.根據權利要求1所述的基因組DNA提取方法，其特征在于，步驟4)為4℃下3000～5000rpm離心10～15min。

6.根據權利要求5所述的基因組DNA提取方法，其特征在于，步驟4)為4℃下3000rpm離心10min。

7.根據權利要求1-6任一項所述的基因組DNA提取方法，其特征在于，所述作物為甘蔗、水稻、玉米、大豆或花生。