[發明專利]檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒及其制備方法

無效

• 申請號: 201110109934.5
• 申請日: 2011-04-29
• 公開（公告）號: CN102191329A
• 公開（公告）日: 2011-09-21
• 發明（設計）人: 師詠勇;王倜;賀林;陳培華
• 申請（專利權）人: 上海交通大學;上海佰真生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海交達專利事務所 31201
• 代理人: 王錫麟;王桂忠

1.一種檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒，其特征在于，包括：PCR試劑組和LDR試劑組，兩個試劑組包裝在同一個盒子中，PCR試劑組，包括：緩沖液、dNTP混合液、Taq?DNA聚合酶、純水和四對PCR專用擴增引物；LDR試劑組，包括：緩沖液、dNTP混合液、Taq?DNA連接酶、純水和四組LDR專用探針。

2.根據權利要求1所述的檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒，其特征是，所述的PCR試劑組，dNTP混合液的濃度為10mM，Taq?DNA聚合酶的濃度為2unit/ul，四對PCR擴增引物為2OD的干粉，使用時，先8000rpm離心十分鐘，然后加入純水溶解，震蕩均勻后使用。

3.根據權利要求書1中所述的檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒，其特征是，所述的LDR試劑組，Taq?DNA聚合酶的濃度為40unit/ul，四對PCR擴增引物為2OD的干粉，使用時，先8000rpm離心十分鐘，然后加入純水溶解，混合均勻后使用。

4.一種根據權利要求1所述的檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

①PCR引物的設計及合成：PCR引物采用引物設計軟件PRIMER3進行引物設計，TM值選擇60度左右；

②LDR探針的設計及合成：LDR探針每個位點包括三條，兩條5’端探針和一條3’端探針；

③Taq?DNA聚合酶和Taq?DNA連接酶采用TAKARA的產品或New?England?Biolabs的產品。

5.根據權利要求4所述的檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒的制備方法，其特征是，所述的LDR探針：兩條5’端探針長度相差2個堿基，反映在該探針的5’端。

6.根據權利要求4所述的檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒的制備方法，其特征是，所述的LDR探針：兩條5’端探針的3’端的最后一個堿基根據SNP位點的基因型確定。

7.根據權利要求4所述的檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒的制備方法，其特征是，所述的LDR探針：兩條5’端探針在距3’端6個堿基的位置認為引入與目標序列不互補的一個堿基。

8.根據權利要求4所述的檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒的制備方法，其特征是，所述的LDR探針：5’端探針的5’末端及3’端探針的3’末端均采用polyT的序列。

9.根據權利要求4所述的檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒的制備方法，其特征是，所述的LDR探針：除上述三點描述外，5’端探針的其他位置與目標序列完全互補。

10.根據權利要求4所述的檢測重度抑郁關聯基因的試劑盒的制備方法，其特征是，所述的LDR探針：3’端探針與目標序列完全互補，且在其5’端加磷酸修飾，其3’端加FAM熒光修飾。