[發(fā)明專利]硝基呋喃類藥物代謝物檢測試劑盒及其制備方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110108477.8 | 申請日: | 2011-04-28 |
| 公開(公告)號: | CN102759622A | 公開(公告)日: | 2012-10-31 |
| 發(fā)明(設計)人: | 陳立柱;楊利;李峰 | 申請(專利權(quán))人: | 寶瑞源生物技術(shù)(北京)有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/577 | 分類號: | G01N33/577;G01N33/532 |
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| 地址: | 102206 北京*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 硝基 呋喃 類藥物 代謝物 檢測 試劑盒 及其 制備 方法 | ||
1.一種硝基呋喃類藥物代謝物檢測試劑盒及其制備方法,其特征在于由呋喃唑酮代謝物檢測試紙條、呋喃它酮的代謝物檢測試紙條、呋喃西林代謝物檢測試紙條、呋喃妥因代謝物檢測試紙條組裝而成。
2.一種權(quán)利要求1所述的硝基呋喃類藥物代謝物檢測試劑盒及其制備方法,其特征在于所包含的試紙條由樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜、吸樣墊和PVC支撐板組成,在PVC支撐板上依次緊密粘附有樣品墊、膠體金墊、硝酸纖維素膜和吸樣墊。所述樣品墊為玻璃纖維;所述膠體金墊為膠體金標記的硝基呋喃類藥物代謝物單克隆抗體聚酯膜;所述硝酸纖維素膜上依次包被有檢測線(T線)和質(zhì)控線(C線),其中檢測線(T線)上包被了硝基呋喃類藥物代謝物偶聯(lián)載體蛋白,質(zhì)控線(C線)上包被了羊抗鼠IgG抗體;所述吸樣墊為吸水紙。
3.一種權(quán)利要求1所述的硝基呋喃類藥物代謝物檢測試劑盒及其制備方法,其特征在于所述的硝基呋喃類藥物代謝物偶聯(lián)載體蛋白為硝基呋喃類藥物代謝物偶聯(lián)牛血清白蛋白或卵清白蛋白;所述的硝基呋喃類藥物代謝物單克隆抗體由硝基呋喃類藥物代謝物偶聯(lián)載體蛋白作為免疫原免疫BALB/C小鼠獲得。
4.一種權(quán)利要求1所述的硝基呋喃類藥物代謝物檢測試劑盒及其制備方法,其特征在于所述的膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑枸櫞酸三鈉作用下制成大小為20-40nm的膠體金顆粒。
5.一種權(quán)利要求1所述的硝基呋喃類藥物代謝物檢測試劑盒及其制備方法,其特征在于所述的膠體金墊的制備方法為:取顆粒大小為20-40nm的膠體金溶液,用0.2mol/L?K2CO3將膠體金溶液的pH值調(diào)至8.0-9.0,室溫放置30分鐘;在上述溶液中加入硝基呋喃類藥物代謝物單克隆抗體,使硝基呋喃類藥物代謝物單克隆抗體的濃度為10-40μg/ml膠體金,混合均勻后,室溫放置30分鐘;然后加入10%BSA溶液,使BSA溶液的濃度為10-30μl/ml膠體金,混合均勻,室溫放置10分鐘;上述溶液于12000轉(zhuǎn)離心30分鐘,仔細吸取上清液,棄去,剩余的沉淀用30-70%初始膠體金體積的膠體金復溶液溶解,得到硝基呋喃類藥物代謝物單克隆抗體-膠體金標記物;將硝基呋喃類藥物代謝物單克隆抗體-膠體金標記物按15-30μl/cm2的比例均勻的鋪在聚酯膜上,放入45℃干燥箱干燥2.5-3小時,制成膠體金墊。
6.一種權(quán)利要求1所述的硝基呋喃類藥物代謝物檢測試劑盒及其制備方法,其特征在于所述的膠體金復溶液為含0.30%Tris,5%蔗糖,0.50%PVP,0.30%Casein-Na,pH值8.0-9.0的溶液。
7.一種權(quán)利要求1所述的硝基呋喃類藥物代謝物檢測試劑盒及其制備方法,其特征在于所述的硝酸纖維素膜上T、C線的包被方法為:將NC膜粘貼在PVC板上,吸水紙貼到PVC板上壓住膜1-1.5mm。打開劃膜儀,按清洗鍵清洗劃膜儀,設置劃膜儀參數(shù)為C線1.0μl/cm,T線1.0μl/cm;將貼好的PVC板放在劃膜儀上,用C、T線包被液在NC膜上分別劃C、T線。劃膜不合格的用紅記號筆標出,將包被板置干燥箱設置45℃,干燥1-1.5小時。其中,T線包被液為0.8-4.0mg/ml的硝基呋喃類藥物代謝物偶聯(lián)載體蛋白;C線包被液為0.6-2.0mg/ml的羊抗鼠IgG抗體。
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