[發明專利]類風濕關節炎圖譜模型的構建方法及其圖譜模型

有效

• 申請號: 201110107562.2
• 申請日: 2011-04-27
• 公開（公告）號: CN102262098A
• 公開（公告）日: 2011-11-30
• 發明（設計）人: 戴勇;歐陽昕
• 申請（專利權）人: 戴勇;歐陽昕
• 主分類號: G01N24/08
• 分類號: G01N24/08;G01N1/28
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 何平

1.一種類風濕關節炎圖譜模型的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：

A1、分別獲取試驗組和參照組已經脫離人體的靜脈血液3ml，靜置25至30分鐘；

A2、分別以3000至4000轉/分鐘離心8至10分鐘；

A3、分別從3/4液面高度處吸取上清液600ul，置于零下60℃至零下80℃環境中保存；

A4、在室溫凍融后，分別從3/4液面高度處吸取200ul所述上清液，加入D₂O為99.5％的重水200ul混合，得到混合液；其中，在吸取所述上清液時，一直保持3/4液面高度；

A5、分別將所述混合液置于5mm核磁管，通過Varian?NMR?600MHz核磁共振譜儀獲取所述混合液的一維氫譜的譜圖；

A6、采用TopSpin軟件分別對所述一維氫譜的譜圖進行傅立葉變換、相位調整、基線校正、定標及積分處理，得到所述上清液的類風濕關節炎譜圖；其中，在進行傅立葉變換時乘以增寬因子為1Hz的指數窗函數，以內標乳酸在1.33ppm的雙峰進行定標處理，并且，在進行積分時，去除水峰積分值后將其余積分值進行加合和歸一化處理；

A7、采用SIMCA-P⁺軟件對試驗組和參照組中的各個上清液的類風濕關節炎譜圖建立主成分分析模型和偏最小二乘法模型，進行多元統計分析；其中，所述多元統計分析包括主成分分析、偏最小二乘法-判別分析及其正交信號校正處理；

A8、根據多元統計分析的分析結果，建立所述類風濕關節炎圖譜模型。

2.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，步驟A7中，所述多元統計分析采用平均中心化換算和自適換算的數據標度換算方式，并且，在所述多元統計分析之后還執行以下步驟A71：采用10折或20折交叉驗證法檢驗各模型的質量，作為所述分析結果的一部分。

3.根據權利要求2所述的構建方法，其特征在于，步驟A71之后還執行以下步驟A72：采用交叉驗證后得到的模型可解釋變量以及模型可預測度，評判各模型的有效性，作為所述分析結果的一部分。

4.根據權利要求3所述的構建方法，其特征在于，步驟A72之后還執行以下步驟A73：通過排列實驗隨機120次至200次改變分類變量的排列順序得到相應的隨機模型可預測度，進一步檢驗各模型的有效性，作為所述分析結果的一部分。

5.根據權利要求4所述的構建方法，其特征在于，步驟A5中，所述通過Varian?NMR?600MHz核磁共振譜儀獲取所述混合液的一維氫譜的譜圖，包括選用標準預飽和壓水的NOESY1DPR序列，弛豫延遲時間為2.4至2.5秒，混合時間為100毫秒，累加次數128次。

6.根據權利要求5所述的構建方法，其特征在于，所述弛豫延遲時間及所述混合時間內，都進行飽和照射。

7.根據權利要求6所述的構建方法，其特征在于，所述室溫為20至25℃，采集時間為0.9541s，譜寬為8384.9Hz。

8.根據權利要求7所述的構建方法，其特征在于，步驟A6中，積分區間為9.0-0.39ppm，積分間距為0.004至0.005ppm。

9.根據權利要求8所述的構建方法，其特征在于，所述重水預冷到9至12攝氏度后再與所述上清液混合。

10.一種類風濕關節炎的圖譜模型，其特征在于，其采用如權利要求1至9任一所述的構建方法構建獲得。