[發(fā)明專利]一種脂肪酶納米高分子生物催化顆粒及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110106886.4 | 申請日： | 2011-04-27 |
| 公開（公告）號： | CN102229923A | 公開（公告）日： | 2011-11-02 |
| 發(fā)明（設計）人： | 須丹丹;劉錚;盧滇楠 | 申請（專利權(quán)）人： | 清華大學 |
| 主分類號： | C12N11/08 | 分類號： | C12N11/08 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 脂肪酶 納米 高分子 生物 催化 顆粒 及其 制備 方法 | ||
1.一種制備脂肪酶納米高分子生物催化顆粒的方法，其特征在于：所述脂肪酶納米高分子生物催化顆粒是以下述質(zhì)量份的物質(zhì)為原料制成的：脂肪酶10份、甲基丙烯酸縮水甘油酯2-200份、乙烯基單體75-375份和引發(fā)劑體系20-30份；
包括如下步驟：1)將所述脂肪酶和所述甲基丙烯酸縮水甘油酯加入pH值為3-8的緩沖溶液中，在0-50℃下反應0.5～3小時；
2)向步驟1)的反應液中加入所述乙烯基單體和所述引發(fā)劑體系，在0-50℃繼續(xù)反應5-12小時，即得到脂肪酶納米高分子生物催化顆粒。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述乙烯基單體是可通過自由基聚合反應形成聚合物的乙烯基單體；所述乙烯基單體優(yōu)選自下述至少一種：丙烯酰胺、N-異丙基丙烯酰胺、丙烯酸、丙烯酰化聚乙二醇、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸羥乙酯、丙烯酸羥乙酯、丙烯酸羥丙酯、甲基丙烯酸羥丙酯、N，N’-甲叉雙丙烯酰胺、順丁二烯和三羥基甲基丙烷三甲基丙烯酸酯；
所述引發(fā)劑體系是在0-50℃條件下能夠引發(fā)產(chǎn)生自由基，導致乙烯基單體發(fā)生自由基聚合的熱引發(fā)劑體系或氧化還原引劑體系；所述引發(fā)劑體系優(yōu)選由下述A和B中的物質(zhì)組成，所述A選自下述至少一種：過硫酸鉀、過硫酸銨、過氧化氫、叔丁基過氧化氫和過氧化苯二甲酰，所述B選自下述至少一種：亞鐵鹽、亞硫酸鹽、N，N’-二甲基苯胺、氨水、N，N’-二甲基-對甲苯胺、N，N，N’，N’-四甲基乙二胺、哌啶和N-甲基嗎啉；所述引發(fā)劑體系最優(yōu)選由過硫酸銨和N，N，N’，N’-四甲基乙二胺組成其質(zhì)量比為1.5∶2；
所述緩沖溶液為下述至少一種物質(zhì)的水溶液：乙酸、乙酸鈉、磷酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸鉀、磷酸氫鉀、磷酸二氫鈉、硼酸、硼酸鈉、硼酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀和碳酸氫鉀。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述甲基丙烯酸縮水甘油酯是以甲基丙烯酸縮水甘油酯的二甲基甲酰胺溶液形式加入pH值為3-8的緩沖溶液中。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的方法，其特征在于：所述方法還包括將步驟2)得到的含脂肪酶納米高分子生物催化顆粒的反應液進行截留分子量為10KDa的透析，并將透析后的液體凍干的步驟。
5.一種制備脂肪酶納米高分子生物催化顆粒的方法，其特征在于：所述脂肪酶納米高分子生物催化顆粒是以下述質(zhì)量份的物質(zhì)為原料制成的：脂肪酶10份、甲基丙烯酸縮水甘油酯2-200份、乙烯基單體75-375份和引發(fā)劑體系20-30份；
包括如下步驟：1)將所述脂肪酶、所述甲基丙烯酸縮水甘油酯和所述乙烯基單體加入pH值為3-8的緩沖溶液中，在0-50℃下反應0.5～3小時；
2)向步驟1)的反應液中加入所述引發(fā)劑體系，在0-50℃繼續(xù)反應5-12小時，即得到脂肪酶納米高分子生物催化顆粒。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述乙烯基單體是可通過自由基聚合反應形成聚合物的乙烯基單體；所述乙烯基單體優(yōu)選自下述至少一種：丙烯酰胺、N-異丙基丙烯酰胺、丙烯酸、丙烯酰化聚乙二醇、甲基丙烯酸、甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸羥乙酯、丙烯酸羥乙酯、丙烯酸羥丙酯、甲基丙烯酸羥丙酯、N，N’-甲叉雙丙烯酰胺、順丁二烯和三羥基甲基丙烷三甲基丙烯酸酯；
所述引發(fā)劑體系是在0-50℃條件下能夠引發(fā)產(chǎn)生自由基，導致乙烯基單體發(fā)生自由基聚合的熱引發(fā)劑體系或氧化還原引劑體系；所述引發(fā)劑體系優(yōu)選由下述A和B中的物質(zhì)組成，所述A選自下述至少一種：過硫酸鉀、過硫酸銨、過氧化氫、叔丁基過氧化氫和過氧化苯二甲酰，所述B選自下述至少一種：亞鐵鹽、亞硫酸鹽、N，N’-二甲基苯胺、氨水、N，N’-二甲基-對甲苯胺、N，N，N’，N’-四甲基乙二胺、哌啶和N-甲基嗎啉；所述引發(fā)劑體系最優(yōu)選由過硫酸銨和N，N，N’，N’-四甲基乙二胺組成其質(zhì)量比為1.5∶2；
所述緩沖溶液為下述至少一種物質(zhì)的水溶液：乙酸、乙酸鈉、磷酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸鉀、磷酸氫鉀、磷酸二氫鈉、硼酸、硼酸鈉、硼酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀和碳酸氫鉀。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于：所述甲基丙烯酸縮水甘油酯是以甲基丙烯酸縮水甘油酯的二甲基甲酰胺溶液形式加入pH值為3-8的緩沖溶液中。
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