[發明專利]鄧老涼茶顆粒指紋圖譜的構建方法及其標準指紋圖譜

無效

• 申請號: 201110098429.5
• 申請日: 2011-04-19
• 公開（公告）號: CN102253135A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發明（設計）人: 張中強;楊運云;鄧潔薇;宋化燦;張翠仙;李娜;郭鵬然;王冠華
• 申請（專利權）人: 中國廣州分析測試中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種廣東涼茶的質量控制方法，具體涉及鄧老涼茶顆粒高效液相色譜法指紋圖譜的構建方法和標準指紋圖譜。

背景技術

廣東涼茶是嶺南人民根據本地的氣候和水土特性，在長期預防疾病與保健過程中以中醫養生理論為指導，以中草藥為基礎，研制總結出來的具有清熱解毒、生津止渴等功效的一類植物飲料。鄧老涼茶是著名的廣東涼茶之一，由金銀花、菊花、白茅根、桑葉、蒲公英和甘草6味藥材組成，具有清熱解毒、祛濕生津、涼血排毒等功效，用于風熱感冒、咽喉腫痛等癥?，F已有鄧老涼茶含糖顆粒、無糖顆粒、罐裝飲料、蜜煉膏、草本含片等劑型上市。

目前國內還沒有文獻報道對鄧老涼茶質量控制的研究。中藥指紋圖譜技術是一種表征中藥所含成分與其質量關系的有效手段，已成為國內外廣泛認可的重要質量評價模式。因此，建立鄧老涼茶制劑的標準指紋圖譜，能從整體上全面反映制劑的內在質量，為其質量控制提供一種提供直觀、簡便、有效的手段。

發明內容

本發明的目的在于為鄧老涼茶顆粒的質量控制和真偽鑒別提供一種新的方法，通過建立鄧老涼茶顆粒指紋圖譜的方法，并由此方法得到鄧老涼茶制劑的標準指紋圖譜。

為達到本發明的目的所采用的技術方案：用高效液相色譜法建立鄧老涼茶顆粒指紋圖譜的方法，具體包括如下步驟：

(1)對照品溶液的制備：

A.綠原酸對照品溶液的制備：精密稱取綠原酸對照品適量，用甲醇配制成每1ml含綠原酸0.2～0.5mg的溶液；

B.新綠原酸對照品溶液的制備：精密稱取新綠原酸對照品適量，用甲醇配制成每1ml含新綠原酸0.2～0.5mg的溶液；

C.異綠原酸A對照品溶液的制備：精密稱取異綠原酸A對照品適量，用甲醇配制成每1ml含異綠原酸A?0.2～0.5mg的溶液；

D.異綠原酸B對照品溶液的制備：精密稱取異綠原酸B對照品適量，用甲醇配制成每1ml含異綠原酸B?0.2～0.5mg的溶液；

E.混合對照品溶液的制備：分別吸取1.00mL綠原酸、新綠原酸、異綠原酸A和異綠原酸B對照品溶液，組成混合對照品溶液；

(2)供試品溶液的制備：精密稱取鄧老涼茶顆粒0.5～20g，50％～100％甲醇提取，采用索氏提取或超聲提取或微波輔助萃取或加速溶劑萃取方法進行提取，提取時間為10～150min，提取液濃縮定容至10～50mL，針孔式微孔濾膜過濾，即得供試品溶液；

(3)色譜條件：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；采用梯度洗脫，流動相A為0.1～3％磷酸溶液，流動相B為乙腈，梯度洗脫時間為20～180min，柱溫：20～50℃，流速0.3～1.0mL/min，紫外檢測波長240～262nm；

(4)測定：精密吸取供試品溶液0.5～10μl注入高效液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，得到指紋圖譜。

(5)相似度評價：供試品指紋圖譜采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A版》進行評價，在240～262nm檢測波長下的相似度均大于0.80。

本發明最佳的檢測方法可以通過下述步驟實施：(2)供試品溶液的制備：稱取鄧老涼茶顆粒5.0g，用濾紙包好，置索氏提取器中，精密加入甲醇150mL，索氏提取1.5h，提取液旋轉蒸餾濃縮至10mL，轉移至25mL的容量瓶中，甲醇加至刻度，搖勻，針孔式微孔濾膜過濾，即得供試品溶液。(3)色譜條件：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；采用梯度洗脫，流動相A為0.5％的磷酸溶液，流動相B為乙腈，洗脫時間為20min，柱溫：25℃，流速0.5mL/min，紫外檢測波長254nm；

在步驟(3)中，所述的梯度洗脫，優選梯度洗脫程序以如下體積濃度配置進行：流動相A為0.5％的磷酸溶液，流動相B為乙腈。梯度洗脫程序如下：

0分鐘時，流動相A為95％、流動相B為5％；

3分鐘時，流動相A為95％、流動相B為5％；

9分鐘時，流動相A為80％、流動相B為20％；

13分鐘時，流動相A為80％、流動相B為20％；

20分鐘時，流動相A為5％、流動相B為95％。