[發(fā)明專利]鄧?yán)蠜霾桀w粒指紋圖譜的構(gòu)建方法及其標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110098429.5
• 申請日: 2011-04-19
• 公開（公告）號: CN102253135A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張中強(qiáng);楊運(yùn)云;鄧潔薇;宋化燦;張翠仙;李娜;郭鵬然;王冠華
• 申請（專利權(quán)）人: 中國廣州分析測試中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種鄧?yán)蠜霾桀w粒制劑指紋圖譜的建立方法，其特征在于采用高效液相色譜法，具體包括如下步驟：

(1)對照品溶液的制備：精密配制綠原酸、新綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B對照品溶液，濃度為0.2～0.5mg/mL；

(2)供試品溶液的制備：精密稱取鄧?yán)蠜霾桀w粒，50％～100％甲醇提取，提取液濃縮定容后，針孔式微孔濾膜過濾，即得供試品溶液；

(3)色譜條件：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，梯度洗脫，柱溫：20～50℃，流速0.3～1.0mL/min，紫外檢測；

(4)測定：精密吸取供試品溶液注入高效液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，得到指紋圖譜；

(5)相似度評價(jià)：供試品指紋圖譜采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價(jià)系統(tǒng)2004A版》進(jìn)行評價(jià)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鄧?yán)蠜霾桀w粒指紋圖譜的建立方法，其特征在于：所述步驟(2)供試品溶液的制備，精密稱取鄧?yán)蠜霾桀w粒0.5～20g，采用索氏提取或超聲提取或微波輔助萃取或加速溶劑萃取方法進(jìn)行提取，提取時(shí)間為10～150min，提取液濃縮定容至10～50mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鄧?yán)蠜霾桀w粒指紋圖譜的建立方法，其特征在于所述步驟(3)梯度洗脫的流動(dòng)相為0.1～3％的磷酸溶液(A)和乙腈(B)，梯度洗脫時(shí)間為20～180min，紫外檢測波長為240～262nm。

4.如權(quán)利要求3所述的鄧?yán)蠜霾桀w粒制劑指紋圖譜的建立方法，其特征在于步驟(3)色譜條件中所述的梯度洗脫，梯度洗脫程序以如下濃度配置進(jìn)行：

0分鐘時(shí)，流動(dòng)相A為95％、流動(dòng)相B為5％；

3分鐘時(shí)，流動(dòng)相A為95％、流動(dòng)相B為5％；

9分鐘時(shí)，流動(dòng)相A為80％、流動(dòng)相B為20％；

13分鐘時(shí)，流動(dòng)相A為80％、流動(dòng)相B為20％；

20分鐘時(shí)，流動(dòng)相A為5％、流動(dòng)相B為95％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鄧?yán)蠜霾桀w粒指紋圖譜的建立方法，其特征在于所述步驟(4)測定：精密吸取供試品溶液0.5～20μl注入高效液相色譜儀，照高效液相色譜法測定，得到指紋圖譜。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鄧?yán)蠜霾桀w粒指紋圖譜的建立方法，其特征是在于所述步驟(5)相似度評價(jià)：供試品指紋圖譜在240～262nm檢測波長下的相似度均大于0.80。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鄧?yán)蠜霾桀w粒指紋圖譜的建立方法，其特征在于測定所得的指紋圖譜中有16個(gè)特征共有峰，其中3號、4號、13號、14號色譜峰分別為綠原酸、新綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸B參照峰，最強(qiáng)峰為3號色譜峰。