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[發(fā)明專利]小麥TaTOC1基因及其克隆方法和應(yīng)用無效

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201110093145.7 申請(qǐng)日: 2011-04-14
公開(公告)號(hào): CN102220347A 公開(公告)日: 2011-10-19
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 張憲省;趙翔宇;陳祥彬;葉興國;潘衍有 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
主分類號(hào): C12N15/29 分類號(hào): C12N15/29;C12N15/10;C12N15/84;A01H5/00
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 271018 *** 國省代碼: 山東;37
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 小麥 tatoc1 基因 及其 克隆 方法 應(yīng)用
【權(quán)利要求書】:

1.小麥TaTOC1基因,其特征在于,包括TaTOC1-A、TaTOC1-B、TaTOC1-D,TaTOC1-A核苷酸序列為SEQ?ID?NO:1;TaTOC1-B核苷酸序列為SEQ?ID?NO:2;TaTOC1-D核苷酸序列為SEQ?ID?NO:3。

2.小麥TaTOC1基因的克隆方法,其特征在于,包括以下步驟:1)利用Trizol試劑盒提取總RNA;2)第一條鏈的合成:取2μg總RNA,加入5×反應(yīng)緩沖液4μl,10mM脫氧核糖核酸2μl,核糖核酸酶抑制劑0.5μl,引物oligodT1μl,反轉(zhuǎn)錄酶2μl,42℃反應(yīng)60分鐘,85℃放置10分鐘終止反應(yīng),稀釋至200μl;3)PCR反應(yīng);4)基因克隆:取2μl?PCR產(chǎn)物與pMD18-T載體進(jìn)行連接,操作步驟按pMD18-T?Vector說明書進(jìn)行;然后連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α菌株,在表面涂5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷和X-gal的含100μg/ml氨芐青霉素的LB平板上生長過夜;挑取白色菌落,在LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)過夜;5)堿法提取質(zhì)粒DNA;6)序列測定;7)5′序列的分離。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥TaTOC1基因在轉(zhuǎn)基因小麥中的應(yīng)用。

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說明:

1、專利原文基于中國國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局專利說明書;

2、支持發(fā)明專利 、實(shí)用新型專利、外觀設(shè)計(jì)專利(升級(jí)中);

3、專利數(shù)據(jù)每周兩次同步更新,支持Adobe PDF格式;

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