[發(fā)明專利]一種利用甘藍游離小孢子不定芽葉片再生DH植株的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110089092.1
• 申請日: 2011-04-11
• 公開（公告）號: CN102204513A
• 公開（公告）日: 2011-10-05
• 發(fā)明（設計）人: 張恩慧;馬勇斌;程永安;楊安平;許忠民;朱守亮;高海娜;馬英夏;李偉;王朝陽
• 申請（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G9/10
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• 代理人: 暫無信息

1.一種利用甘藍游離小孢子不定芽葉片再生DH植株的方法，其特征在于，包括以下步驟：A1，胚狀體不定芽誘導；A2，外植體獲得：以小孢子胚狀體誘導出不定芽葉片達1cm時起計算葉片生長日齡，選用一定生長日齡的葉片作為離體培養(yǎng)的外植體；A3，外植體再生芽的分化誘導，將步驟A2獲得的外植體接種于外植體再生芽分化培養(yǎng)基上進行離體培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：溫度(25±1)℃，光照16h·d^-1，光強為2000lx的條件下誘導培養(yǎng)；A4，再生芽的生根誘導與移栽，剪下長有3～4片葉的再生芽插入MS+NAA?0.3mg·L^-1生根培養(yǎng)基進行生根；當DH株根系長至4～5cm左右時開始煉苗，三角瓶封口膜先半開半閉，2天后完全打開，7天后取出DH株小苗將根部殘留培養(yǎng)基用流水洗凈，移栽到裝有專用培養(yǎng)土的培養(yǎng)缽中，所述的專用培養(yǎng)土，按照體積比計為培養(yǎng)土∶珍珠巖∶蛭石＝2∶1∶1，同時將培養(yǎng)缽放至有少量水的穴盤之中并置于半陰處，加強澆水管理，1周后帶基質(zhì)移栽到大田中。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟A2中，所述的外植體葉片生長日齡為25天。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述外植體再生芽分化培養(yǎng)基為：MS+6-BA?2.0mg·L^-1+NAA?0.1mg·L^-1+GA₃1.5mg·L^-1；蔗糖、瓊脂濃度和pH值分別為30g·L^-1、8g·L^-1和5.8。