[發明專利]檢測人乳頭狀瘤病毒亞型的熒光PCR試劑盒

有效

• 申請號: 201110087602.1
• 申請日: 2011-04-08
• 公開（公告）號: CN102140554A
• 公開（公告）日: 2011-08-03
• 發明（設計）人: 張旭;劉中華;孔祥賓;張蓉
• 申請（專利權）人: 江蘇碩世生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;余光軍

技術領域

本發明涉及一種檢測病毒亞型的試劑盒，尤其涉及一種檢測人乳頭狀瘤病毒亞型的熒光PCR試劑盒，屬于人乳頭狀瘤病毒亞型的檢測領域。

背景技術

人乳頭狀瘤病毒(Human?Papillomavirus，簡稱HPV)屬于乳頭瘤病毒屬，和所有乳頭瘤病毒屬病毒一樣，是一種特異性感染皮膚或粘膜復層上皮的病毒。目前，HPV已被發現的亞型有接近兩百種，其中大部分感染人類后并沒有明顯癥狀表現，少數部分有病理表現，有些會可引起人類疣，如生長在生殖器官附近皮膚和粘膜上的人類尋常疣、尖銳濕疣；一些高危亞型會引起人類的腫瘤，某些情況下會導致宮頸癌、陰道癌、肛門癌、陰莖癌等。

HPV是一種雙鏈DNA病毒，屬于乳多空病毒科，是一種嗜上皮性病毒，在人和動物中分布廣泛，有高度的特異性，種間不存在交叉感染，其基因組長度約為8000bp，主要由早期基因區(E區)、晚期基因區(L區)和長控制區((long?control?region，LCR)組成。E區有6個開放式閱讀框(ORF)，即E1，E2，E4，E5，E6，E7。

HPV基因組高度變異，目前發現的HPV共有100余種基因型，按其感染部位可分為兩種：皮膚型與粘膜型，其中約有40多種能夠感染生殖腔。HPV感染人體后，會在宿主細胞內不斷復制，并將病毒基因嵌合入人體基因中，改變細胞的功能。經過一段時間的演變，加上周圍環境因素的影響，使細胞癌化。

在年輕女性中，多數HPV感染者持續時間較短，對身體不會造成嚴重危害，一年內70％的感染者轉化為陰性，兩年內90％的感染者轉化為陰性。然而，仍有5％-10％的感染者持續感染，持續感染者高度危險，有很大可能發生宮頸癌癌前病變，進一步會演變成侵入性子宮頸癌。幸運的是，這個演變需要一定的時間，這段時間為診斷和治療提供了良好的時機。

在1995年的IARC專題討論會上確定了HPV某些亞型長期和反復地感染HPV是宮頸癌發生的主要原因。目前，人類把與宮頸癌發生有關的HPV亞型稱為高危亞型，有HPV?16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，26，82，73等；與腫瘤不相關的稱為低危亞型，最常見的為HPV?6，11和44等。

子宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，根據世界衛生組織統計，每年大約有50萬左右的宮頸癌新發病例，占所有癌癥新發病例的5％，在中國每年約有8萬左右的女性死于宮頸癌。

HPV感染是宮頸癌的直接病因，從感染到最終宮頸癌的發生就大多數患者而言有一個緩慢的潛伏期，為此，及時定期檢測宮頸脫落細胞中HPV的有無在宮頸癌的早期篩查、輔助診斷和愈后評估等環節中顯得尤為重要。

HPV感染通常是沒有癥狀的，HPV感染在人群中非常常見。據世衛組織研究統計，曾感染HPV的人數，在性活躍期男女中的比率為50％，到50歲該數字增加到80％，所以它是世界上第一大傳染疾病。全世界每年有約10-15％的新發病例。雖然大部分婦女HPV感染期比較短，一般在8-10個月左右，但仍有大約10-15％的35歲以上的婦女有持續感染的情況。這些持續感染HPV的婦女，患子宮頸癌的風險更高。過去，因缺少高靈敏度和特異性的HPV診斷試劑，大約70％的感染者在最初的兩年是無法檢測到HPV的。大部分感染了HPV的婦女將會發展為輕度宮頸損傷，而大多數輕度損傷都是可以自動恢復的。有研究表明約有15％的HPV感染者將會在兩年內發展為重度損傷，而重度宮頸損傷極有可能發展為惡性癌變，有統計認為大約1/3的重度宮頸損傷將在10年內(而最近在很多案例中發現轉癌速度可以短至三年內)發展為癌癥。在診斷及防治這方面仍然缺乏有效的措施。