[發明專利]高比活耐熱N-酰基高絲氨酸內酯酶AiiA-AIO6及其編碼基因與應用

有效

• 申請號: 201110082565.5
• 申請日: 2011-04-01
• 公開（公告）號: CN102212508A
• 公開（公告）日: 2011-10-12
• 發明（設計）人: 周志剛;張美超;曹雅男;何夙旭;毛瑋;張宇婷;霍鳳敏;徐俐
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院飼料研究所
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;C12N15/55;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/21;C12N15/11;A01N63/02;A01P1/00;C12R1/01;C12R1/91;C12R1/19
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種蛋白質，為如下(a)或(b)或(c)：

(a)序列表中序列1自N末端第2至269位氨基酸殘基組成的蛋白質；

(b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

(c)將序列1的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有N-酰基高絲氨酸內酯酶功能的由序列1衍生的蛋白質。

2.編碼權利要求1所述蛋白的基因。

3.如權利要求2所述的基因，其特征在于：它為如下1)或2)或3)或4)或5)的DNA分子：

1)序列表中序列2自5’末端第4至807位核苷酸所示的DNA分子；

2)序列表中序列2自5’末端第4至810位核苷酸所示的DNA分子；

3)序列表中序列2所示的DNA分子；

4)在嚴格條件下與1)或2)或3)限定的DNA序列雜交且編碼具有N-酰基高絲氨酸內酯酶活性的蛋白的DNA分子；

5)與1)或2)或3)限定的DNA序列具有90％以上同源性且編碼具有N-酰基高絲氨酸內酯酶活性的蛋白的DNA分子。

4.含有權利要求2或3所述基因的重組表達載體、表達盒、轉基因細胞系或重組菌。

5.如權利要求4所述的重組表達載體，其特征在于：所述重組表達載體為將權利要求2或3所述基因插入載體pET-28a(+)的多克隆位點得到的重組質粒。

6.如權利要求4所述的重組菌，其特征在于：所述重組菌為將權利要求4或5所述重組表達載體導入大腸桿菌得到的重組菌；所述大腸桿菌優選為大腸桿菌(Escherichia?coli)BL21(DE3)。

7.如權利要求6所述的重組菌，其特征在于：所述重組菌為大腸埃希氏菌(Escherichia?coli)BL21pET28a(+)/aiia-AIO6，其保藏號為CGMCC?No.4621。。

8.擴增權利要求2或3所述基因全長或其任意片段的引物對。

9.權利要求1所述蛋白在降解N-酰基高絲氨酸內酯中的應用。

10.根據權利要求8所述的應用，其特征在于：所述N-酰基高絲氨酸內酯為C4-HSL、C6-HSL、C7-HSL、C8-HSL、C?10-HSL、3-oxo-C6-HSL、3-oxo-C8-HSL、3-oxo-C14-HSL、3-oxo-C10-HSL、3-hydroxy-C12-HSL和3-hydroxy-C14-HSL中的至少一種；所述降解的溫度為0℃-50℃，優選為30℃；所述降解的pH值為6.0-9.0，優選為8.0。