[發(fā)明專利]煙草及煙草制品中水溶性糖的測(cè)定方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110082068.5
• 申請(qǐng)日: 2011-04-01
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102230923A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 湯建國(guó);孟昭宇;牟定榮;喬丹娜;楊柳;陸舍銘
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 紅塔煙草（集團(tuán)）有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88
• 代理公司: 昆明今威專利代理有限公司 53115
• 代理人: 趙云

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于一種煙草及煙草制品中水溶性糖的測(cè)定方法，該方法利用超聲萃取煙草及煙草制品中水溶性糖，采用超高效液相色譜儀測(cè)定煙草及煙草制品中水溶性糖含量。

背景技術(shù)

糖類物質(zhì)是煙草中一類重要化合物，煙草中糖類化合物種類較多，在煙草植物體中含量可達(dá)到干重的25％～50％，對(duì)煙葉品質(zhì)影響比較大的是水溶性糖、淀粉、纖維素和果膠質(zhì)等。煙草中水溶性糖(尤其是還原糖)與煙葉外觀質(zhì)量、內(nèi)在質(zhì)量、物理特性有密切的關(guān)系，水溶性糖含量高的煙葉比較柔軟、色澤好；水溶性糖類在煙草制品燃吸過(guò)程中進(jìn)行酸性反應(yīng)，使吃味醇和，也是形成香氣物質(zhì)的重要前體；水溶性糖具有一定程度保潤(rùn)作用，是體現(xiàn)煙草優(yōu)良品質(zhì)的指標(biāo)之一。因此，測(cè)定煙草中水溶性糖含量及其變化規(guī)律，對(duì)煙草生產(chǎn)、卷煙配方以及吸煙與健康研究具有實(shí)際意義。

目前，煙草中水溶性糖測(cè)定方法主要有比色法、紅外分光光度法、連續(xù)流動(dòng)分析法、毛細(xì)管電泳法、離子色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法。最近，煙草行業(yè)相繼發(fā)布了兩項(xiàng)煙草及煙草制品中水溶性糖的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)-《YC/T159-2002煙草及煙草制品水溶性糖的測(cè)定連續(xù)流動(dòng)法》、《YC/T?251-2008煙草及煙草制品葡萄糖、果糖、蔗糖的測(cè)定離子色譜法》。

隨著色譜技術(shù)不斷發(fā)展，氣相色譜法和高效液相色譜法已經(jīng)成為測(cè)定糖類化合物的主要方法，由于氣相色譜需要糖類化合物衍生化后才能分析，高效液相色譜的示差折光檢測(cè)和蒸發(fā)光散射檢測(cè)不需衍生化，樣品經(jīng)前處理即可直接進(jìn)樣，高效液相色譜法更適合于糖類化合物的分析檢測(cè)。

高效液相色譜法中的示差折光檢測(cè)器對(duì)環(huán)境的溫度比較敏感，靈敏度較低且不能用于梯度洗脫，中國(guó)專利文獻(xiàn)CN200910194169.4公開(kāi)了一種煙草中的水溶性糖的測(cè)定方法，該方法建立了高效液相色譜結(jié)合示差折光檢測(cè)器測(cè)定煙草中水溶性糖的方法，該方法的線性良好，回收率在99.2％～101.7％之間，精密度在0.14％～0.86％之間，果糖、葡萄糖和蔗糖的檢出限在0.39μg/mL～0.71μg/mL之間。該方法不使用有毒試劑，經(jīng)實(shí)驗(yàn)對(duì)比，和現(xiàn)有離子色譜法檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)結(jié)果一致，可用于各種煙草樣品中水溶性糖的快速、批量檢測(cè)。

蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)是一種基于不揮發(fā)的樣品顆粒對(duì)光的散射程度與其質(zhì)量成正比而進(jìn)行檢測(cè)的質(zhì)量檢測(cè)器，對(duì)沒(méi)有紫外吸收、熒光或電活性的物質(zhì)以及產(chǎn)生末端紫外吸收的物質(zhì)均能產(chǎn)生響應(yīng)，故ELSD穩(wěn)定性好、靈敏度高，可以用梯度洗脫，適宜于煙草中水溶性糖的分析測(cè)定。孫雨安、楊俊、王嵐等先后利用該高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)法測(cè)定了煙草中的水溶性糖，取得了較好的分析效果(分析科學(xué)學(xué)報(bào)，2004，20(5)：531-533；分析化學(xué)，2005，33(11)：1596-1598；煙草科技，2006，(8)：25-28)。

超高效液相色譜是分離科學(xué)中的一個(gè)全新類別，UPLC借助于HPLC的理論及原理，涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測(cè)手段等全新技術(shù)，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。與傳統(tǒng)的HPLC相比，UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍。

由于超高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器分析測(cè)定是一項(xiàng)近年出現(xiàn)的全新技術(shù)，如何利用其分析測(cè)定特定領(lǐng)域——煙草及煙草制品中多種水溶性糖，目前人們還未進(jìn)行廣泛研究，所以迄今為止，現(xiàn)有技術(shù)中還沒(méi)有相關(guān)的分析方法的技術(shù)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種利用超高效液相色譜儀來(lái)測(cè)定煙草及煙草制品中水溶性糖的方法，該方法具有操作簡(jiǎn)便、分析速度快、靈敏度高、準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性好，特別適用于大批量樣品分析的煙草及其煙草制品中多種水溶性糖的分析。

本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的在超聲頻率30KHz～40KHz、超聲聲強(qiáng)0.4～50W/cm²下，以乙腈和水混合液為萃取溶液，在20℃～50℃下，經(jīng)15min～60min萃取煙草及煙草制品中水溶性糖；以Amide色譜柱為分析柱，以乙腈和水混合液作為流動(dòng)相，采用配備了蒸發(fā)光散射檢測(cè)器的超高效液相色譜儀測(cè)定煙草及煙草制品中水溶性糖含量。