[發明專利]從動物血中提取高純短肽蛋白粉的方法無效
| 申請號: | 201110077195.6 | 申請日: | 2011-03-30 |
| 公開(公告)號: | CN102210372A | 公開(公告)日: | 2011-10-12 |
| 發明(設計)人: | 景志剛;楊洋 | 申請(專利權)人: | 景志剛;楊洋 |
| 主分類號: | A23J1/06 | 分類號: | A23J1/06 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 050081 河北省石家*** | 國省代碼: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 動物 提取 高純 蛋白粉 方法 | ||
1.一種從動物血中提取高純短肽蛋白粉的方法,其特征在于它包括以下步驟:(a)將動物血用離心機分離為血漿和紅血球;(b)對紅血球進行熱變性處理;(c)超濾濃縮;(d)沉淀處理;(e)層析;(f)冷凍干燥。
2.如權利要求1所述的從動物血中提取高純短肽蛋白粉的方法,其特征在于所述的離心機為碟式分離機。
3.如權利要求1所述的從動物血中提取高純短肽蛋白粉的方法,其特征在于所述的熱變性處理為:將收集的紅細胞每100升加入3~5公斤氯化鈉,30~50克氯化銅,蒸餾水90~110升攪勻,水浴加熱到68-70℃恒溫25~35分鐘,將反應液泵入冷卻罐,攪拌機攪拌,迅速冷卻至室溫,攪拌1~3小時,甩干機甩干過濾去除變性血紅蛋白,得濾液1;將濾液1在60~70℃恒溫水浴下,向濾液中慢慢加入30~50克氯化銅,至濾液清澈變為淡藍色為止,保溫15~25分鐘,將反應液泵入冷卻罐,攪拌機攪拌,迅速冷卻至室溫,攪拌1~3小時,甩干機甩干過濾去除變性血紅蛋白,得濾液2。
4.如權利要求1所述的從動物血中提取高純短肽蛋白粉的方法,其特征在于所述的超濾濃縮為:將濾液2經布氏漏斗抽濾去除細微顆粒,經中空纖維超濾器超濾濃縮至總體積的1/20~3/20,收集濃縮液,中空纖維超濾器的截留分子量選為5~15千道爾頓。
5.如權利要求1所述的從動物血中提取高純短肽蛋白粉的方法,其特征在于所述的沉淀處理為:在濃縮液中,不斷攪拌下緩慢加入預冷的0.6~0.8倍全體積的工業丙酮,3~5℃放置0.5~1.5小時,產生大量絮狀沉淀,3000~3500轉/分冷凍離心25~35分鐘,沉淀留用;將上清液回收再次不斷攪拌下緩慢加入預冷的0.5~0.75倍全體積的工業丙酮,3.5~4℃放置1~1.5小時,3000~3500轉/分冷凍離心25~35分鐘,將兩次沉淀合并,加入少量去離子水,充分攪勻,裝入透析袋透析11~13小時,3000~3500轉/分冷凍離心25~35分鐘,離心除去不溶性蛋白,得透析液。
6.如權利要求1所述的從動物血中提取高純短肽蛋白粉的方法,其特征在于所述的層析為:空纖維離子交換柱預先用2~32.5毫摩爾/升的磷酸鉀緩沖液酸堿度值7.8平衡,透析液上在層析柱上,完畢后用同一緩沖液洗脫至280納米下的吸收率低于0.02,然后用2.5~2002.5毫摩爾/升的酸堿度7.8磷酸緩沖液進行梯度洗脫,用部分收集器收集,在洗脫過程中,亦可通過肉眼觀察收集淡藍色蛋白粉區帶,測定收集液中的酶活力符合酶純化標準的收集管,混合其收集液。
7.如權利要求1所述的從動物血中提取高純短肽蛋白粉的方法,其特征在于所述的冷凍干燥為:收集液經去離子水透析11~13小時,冷凍干燥。
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