[發明專利]同時測定2-酮基-L-古龍酸、維生素C 和2-酮基-L-古龍酸甲酯含量的方法

有效

• 申請號: 201110061423.0
• 申請日: 2011-03-15
• 公開（公告）號: CN102183612A
• 公開（公告）日: 2011-09-14
• 發明（設計）人: 米超杰;崔旭東
• 申請（專利權）人: 山東潤鑫精細化工有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京潤澤恒知識產權代理有限公司 11319
• 代理人: 蘇培華

技術領域

本發明涉及化學分析技術領域，特別是涉及一種同時測定2-酮基-L-古龍酸、維生素C和2-酮基-L-古龍酸甲酯含量的方法。

背景技術

通常維生素C酯化轉化工藝過程包括如下步驟：酯化反應步驟，將2-酮基-L-古龍酸(又名：2-酮基-L-古洛糖酸)在甲醇中用濃硫酸催化酯化生成2-酮基-L-古龍酸甲酯；轉化反應步驟，用NaHCO₃將2-酮基-L-古龍酸甲酯轉化為維生素C鈉鹽；酸化反應步驟，用維生素C鈉鹽中加入H₂SO₄，酸化成維生素C。

在上述工藝階段中，有可能生成的產物有：維生素C、2-酮基-L-古龍酸甲酯。酯化反應是可逆反應，而酯化、轉化、酸化反應為連續整體單元生產操作。為了提高維生素C鈉的質量和收率，必須對酯化轉化反應的操作條件進行優化，對酯化轉化反應的終點進行監控。必須監控的數據包括：酯化反應終點料液中生成的2-酮基-L-古龍酸甲酯的濃度、副產物維生素C(鈉)的濃度、料液中殘留的2-酮基-L-古龍酸鈉濃度，以及轉化反應終點母液中2-酮基-L-古龍酸甲酯殘留濃度、維生素C鈉的濃度等。故酯化、轉化和酸化程度需要進行監測。

單獨測定2-酮基-L-古龍酸、維生素C的方法和報道很多，而2-酮基-L-古龍酸甲酯的檢驗方法并不多。但這些方法均不能滿足維生素C生產過程中的酯化轉化階段的中間監控的需要，即：不能針對酯化轉化階段反應液，同時對上述三者進行測定，并且分析反應時間也較長。

2-酮基-L-古龍酸的單獨檢驗方法主要有碘量法、酸堿滴定法、高效液相色譜法。一般碘量法為：精密稱取樣品約5g，于100ml容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精密移取2ml，于50ml干燥的試管中，用刻度吸管準確加入7.0mol/L硫酸溶液2ml，搖勻，在沸水浴中加熱煮沸30分鐘，取出稍冷后用水沖洗轉移入250ml錐形瓶中，加淀粉指示液1～2ml，用0.05mol/L碘液滴定至溶液顯藍色(30秒內不退)為終點，根據消耗碘滴定液的體積計算2-酮基-L-古龍酸的含量。本方法適用于測定成品2-酮基-L-古龍酸，作為酯化轉化階段反應液的測定方法，則專屬性差，受到酯化轉化階段的副產物維生素C、酯化產物2-酮基-L-古龍酸甲酯的嚴重影響。例如，專利號為200410020337.5的專利公開了一種2-酮基-L-古龍酸含量的分析方法，就是采用碘量法，同樣存在類似問題，而且其方法分析時間長達80分鐘以上，完全不能滿足中間控制的及時性的要求。此外，由于硫酸是催化劑，會與酯化轉化階段的產物產生化學反應，因此，酸堿滴定法也不能用于酯化轉化階段反應液的監控。

維生素C的經典檢驗方法是碘量法，作為酯化轉化階段反應液的測定方法，同樣受到酯化轉化的副產物的嚴重影響，不能滿足中間控制的需要。

2-酮基-L-古龍酸甲酯的業內檢驗方法是首先用氫氧化鈉溶液調節樣品溶液至弱堿性，加熱使2-酮基-L-古龍酸甲酯水解為2-酮基-L-古龍酸和甲醇，然后再用氫氧化鈉滴定液滴定至中性。此方法也適用于測定成品，專屬性較差，不能準確測定酯化轉化階段2-酮基-L-古龍酸甲酯的含量。

上述方法均是針對單一成品進行測量，不能滿足工藝生產過程中對中間監控的需要。目前，人們提出了高效液相色譜法(HPLC，High?PerformanceLiquid?Chromatography)，以應用在化學工藝過程中的含量測定。

目前公開的高效液相色譜法，僅提出了其應用于2-酮基-L-古龍酸的測定。例如，2005年10月出版的《生物技術》第15卷第5期公開了“2-酮基-L-古龍酸的高效液相色譜分析”，適用于鑒定發酵液中的產物是2-酮基-L-古龍酸。具體方法是：用高效液相色譜法測定氧化葡萄糖酸桿菌(Gluconobacter)和蠟狀芽孢桿菌(Bacillus?cereus)混合發酵液中的2-酮基-L-古龍酸。采用AnlinexA27柱46X250mm～流動相為十二烷基硫酸鈉(0.01mol/L)/乙腈(3％)＝2/3，流速1.0mL/min，柱溫30℃；用L-7420uv檢測器檢測。從該文中可以看出，此方法不適用于維生素C生產過程中的酯化轉化階段反應液的2-酮基-L-古龍酸、維生素C、2-酮基-L-古龍酸甲酯含量測定。