[發明專利]含羥基紅花黃色素A的紅花有效組分制備方法和用途

有效

• 申請號: 201110059031.0
• 申請日: 2011-03-13
• 公開（公告）號: CN102119984A
• 公開（公告）日: 2011-07-13
• 發明（設計）人: 程翼宇;王毅;李云飛;葛志偉
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K36/86
• 分類號: A61K36/86;A61K31/351;A61P9/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高;趙杭麗

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技術領域

本發明屬中藥領域，涉及一種治療心血管疾病的中藥提取物的制備方法，具體地說涉及從紅花中提取的有效組分及其制備方法與醫藥用途，該有效組分主要含有羥基紅花黃色素A和6?-羥基山柰酚-3，6，7-三葡萄糖苷等幾種化合物。

背景技術

心血管疾病是危害人類健康的第一殺手，近年來，隨著我國人口老年化以及人們工作、生活、飲食結構及環境等的變化，冠心病等心腦血管疾病的發生率也逐年增多，嚴重威脅著人民的身心健康。天然產物中許多活性物質具有抗心肌缺血、缺氧作用，其中一些已開發成治療冠心病和心絞痛的新藥。因而從天然產物中尋找具有抗心肌缺血、缺氧生理活性的有效物質，是發現、開發新藥的有效途徑之一。我國藥用生物資源十分豐富，其生理活性物質是研究和發現新藥先導化學物，開發新藥的天然寶庫。目前，我國從天然產物中提取活性物質，用于開發成治療冠心病、安全性好、毒性低的新藥還很少，從天然產物中提取活性物質，開發成具有抗心肌缺血，用于治療冠心病和心絞痛的新藥，具有重要應用價值和廣闊發展前景。

紅花為菊科植物紅花Carthamus?tinctorius?L.的管狀花。性味?性溫，味辛，具有活血通徑、散瘀止痛的功效。含有紅花黃色素（Safflor?yellow）、紅花苷（Carthamin）、15α，20β-二羥基-Δ4-娠烯-3-酮（15α，20β?-Dihydroxy-Δ4-pregnen-3-one）、木犀草素-7-葡萄糖苷（Luteolin-7-glucoside）、紅花醌苷（carthamone）、新紅花苷（neo-cqrthamin）、腺嘌呤核苷(adenosine)、黃色素（safflor?yellow?A）、山柰酚、槲皮素及山柰酚-3-葡萄糖苷、槲皮素-3-葡萄糖苷、桷皮素-7-葡萄糖苷、山柰酚?–3-蕓香糖苷和蘆丁（rutin）、紅花多糖等化合物。

現代藥理研究表明：紅花水提取物及紅花水溶性混合物-紅花黃色素有增加冠脈血流量及心肌營養性血流量的作用，在兔、大鼠、犬等造成實驗性心肌缺血或心肌梗塞的動物模型上，紅花及其制劑均有不同程度的對抗作用。紅花可使因垂體后葉素引起的大鼠或家兔急性心肌缺血有明顯保護作用；可使反復短暫阻斷冠狀動脈血流造成麻醉犬急性心肌缺血的程度明顯減輕，范圍縮小，心率減慢，并保護急性心肌梗塞區的邊緣，縮小梗塞范圍及降低邊緣區心電圖ST段抬高的幅度，從而改善缺血心肌氧的供求關系。紅花具有非常顯著地抑制ADP誘導的家兔血小板聚集作用，并對ADP已聚集的血小板也有非常明顯的解聚作用。紅花尚可明顯延長家兔血漿復鈣時間、凝血酶原時間和凝血時間。表明它能同時影響體內和體外的凝血系統。此外，紅花油有降低血脂作用。紅花具有以上對心血管系統的明顯藥理作用，因此，從紅花中分離出有效組分，開發出治療心血管疾病的現代中藥具有重要的意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種紅花有效組分的制備方法，通過以下步驟實現：將紅花藥材加入乙酸乙酯和乙醇，加熱提取，藥渣加乙醇水溶液提取，將提取液濃縮成浸膏，用反相硅膠柱對其進行分離，首先用低濃度甲醇作為流動相，得洗脫液I，棄之，然后改用高濃度甲醇作為流動相，得洗脫液II，將洗脫液II濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續分離得到的樣品；制備色譜的分離條件：色譜柱為制備柱，流動相為水和乙腈，梯度洗脫。所述紅花有效組分主要含有羥基紅花黃色素A和6-羥基山柰酚-3，6，7-三葡萄糖苷。

優選的，本發明的紅花有效組分制備方法，包括下列步驟：取紅花藥材，將其粉碎后加入體積比為1:1的乙酸乙酯和乙醇，加熱回流1小時，提取2次，濾液合并得提取液I。藥渣加入70%乙醇，加熱回流1小時，提取2次，濾液合并得提取液II，將提取液II濃縮成浸膏，用50%甲醇溶解浸膏，采用ODS-C₁₈柱對其進行分離，首先用5%甲醇作為流動相，得洗脫液I，然后改用70%甲醇作為流動相，得洗脫液II，濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續分離得到的樣品：制備色譜的分離條件：色譜柱為制備柱(ZORBAX?SB?C₁₈;21.2mm???????????????????????????????????????????????250mm,7)，流動相為水A和乙腈B，梯度洗脫程序如下：0min時，流動相A?為90%的水，流動相B為10%的乙腈溶液；40?min時，流動相A?為65%的水，流動相B為35%的乙腈溶液；流速為10ml/min，柱溫為室溫；樣品經制備液相色譜分離，在4.8~7.4min時間段收集溶液，溶液經濃縮干燥后得到有效組分。