[發(fā)明專(zhuān)利]花生Δ12-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110058563.2
• 申請(qǐng)日: 2011-03-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102199661A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-09-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王傳堂;于洪濤;唐月異;王秀貞;楊偉強(qiáng);張建成;禹山林;髙華援;張樹(shù)偉;李貴杰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東省花生研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 青島發(fā)思特專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 37212
• 代理人: 鞏同海

1.一種花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)針對(duì)脂肪酸脫氫酶基因FAD2A、FAD2B的野生型和突變型基因各設(shè)計(jì)一套PCR引物組合和檢測(cè)體系；

(2)采用通用的PCR反應(yīng)程序；

(3)瓊脂糖凝膠檢測(cè)判讀個(gè)體的基因型，每個(gè)檢測(cè)體系中出現(xiàn)一條1241bp的內(nèi)參帶，標(biāo)志PCR反應(yīng)程序成功。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在于，對(duì)FAD2A和FAD2B的野生型和突變型基因各設(shè)置25μl?PCR檢測(cè)體系。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在于，F(xiàn)AD2A野生型基因的檢測(cè)體系為：

2×Taq?PCR?MasterMix??12.5μl；

引物FAD2A-F：1μl；

引物FAD2A-G：1μl；

引物FAD2-R：0.1-0.8μl；

模板DNA：＜1μg；

ddH₂O：補(bǔ)至25μl。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在于，所述的引物FAD2A-F序列為GATTACTGATTATTGACTTGCTTTG；引物FAD2A-G序列為GTTTTGGGACAAACACTTCTTC??；引物FAD2-R序列為CTCTGACTATGCATCAGAACTTGT。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在于，F(xiàn)AD2A突變型基因的檢測(cè)體系為：

2×Taq?PCR?MasterMix?12.5μl；

引物FAD2A-F：1μl；

引物FAD2A-A：1μl；

引物FAD2-R：0.1-0.8μl；

模板DNA：＜1μg；

ddH₂O：補(bǔ)至25μl。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在于，所述的引物FAD2A-F序列為GATTACTGATTATTGACTTGCTTTG；引物FAD2A-A序列為GTTTTGGGACAAACACTTCTTT??；引物FAD2-R序列為CTCTGACTATGCATCAGAACTTGT。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在

于，F(xiàn)AD2B野生型基因的檢測(cè)體系為：

2×Taq?PCR?MasterMix?12.5μl；

引物FAD2B-F：1μl；

引物FAD2B-C：1μl；

引物FAD2-R：0.1-0.8μl；

模板DNA：＜1μg；

ddH₂O：補(bǔ)至25μl。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在于，所述的引物FAD2B-F序列為CAGAACCATTAGCTTTGTAGTAGTG；引物FAD2B-C序列為AACACTTCGTCGCGGTTG??；引物FAD2-R序列為CTCTGACTATGCATCAGAACTTGT。

9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在于，F(xiàn)AD2B突變型基因的檢測(cè)體系為：

2×Taq?PCR?MasterMix??12.5μl；

引物FAD2B-F：1μl；

引物FAD2B-A：1μl；

引物FAD2-R：0.1-0.8μl；

模板DNA：＜1μg；

ddH₂O：補(bǔ)至25μl。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的花生Δ¹²-脂肪酸脫氫酶基因快速分型方法，其特征在于，所述的引物FAD2B-F序列為CAGAACCATTAGCTTTGTAGTAGTG；引物FAD2B-A序列為AACACTTCGTCGCGGTTT；引物FAD2-R序列為CTCTGACTATGCATCAGAACTTGT。