[發明專利]依維莫司的純化方法

有效

• 申請號: 201110055086.4
• 申請日: 2011-03-09
• 公開（公告）號: CN102174053A
• 公開（公告）日: 2011-09-07
• 發明（設計）人: 朱輝;陶永祥;鄧濤;龍燕;趙磊;張翠英;莫洪;劉巍;楊旭成;陳茂林;周彤;朱宇
• 申請（專利權）人: 成都雅途生物技術有限公司
• 主分類號: C07D498/18
• 分類號: C07D498/18
• 代理公司: 四川省成都市天策商標專利事務所 51213
• 代理人: 劉興亮

技術領域

本發明涉及一種化學物質的分離純化方法，具體涉及依維莫司的純化方法。

背景技術

雷帕霉素，是20世紀70年代初由加拿大Wyeth-Ayerst研究所從放線菌吸水鏈霉菌(Streptomyces?hygroscopicus)培養液中分離出來的31元大環內酯類抗生素。1989年由美國Home?Products公司將其作為抗移植排異反應的新藥進入臨床，并于1999年9月通過美國FDA批準上市。近年的研究表明，雷帕霉素在預防同種異體腎移植術后排斥反應、各種支架管置人導致的血管再狹窄及抗腫瘤等方面具有重要作用。同時由Cordis公司研發的以雷帕霉素作為涂層藥物的血管支架Cypher已于2002年相繼在歐洲、美國和日本上市；而由美國惠氏公司開發的雷帕霉素作為抗癌藥現已進入臨床試驗階段，大量的試驗已經證實，雷帕霉素可抑制多種癌細胞的生長。盡管如此，雷帕霉素也存在一些副作用，如可能會發生疲倦無力、惡心、白細胞減少等。雖然雷帕霉素的生物活性很強，但由于其生物利用度低和水溶性差、結構不穩定等，使得該藥物一直是通過非腸道給藥系統使用。

為了在臨床上更好地發揮療效，人們對雷帕霉素的結構和功能進行了大量的研究，并獲得了一系列具有臨床價值的雷帕霉素衍生物，其中就包括依維莫司。依維莫司的結構式如下：

依維莫司是由瑞士諾華公司研發的具一定水溶性的雷帕霉素衍生物，可以口服給藥，臨床上主要用來預防腎移植和心臟移植手術后的排斥反應。其作用機制主要包括免疫抑制作用、抗腫瘤作用、抗病毒作用、血管保護作用，常與環孢素等其他免疫抑制劑聯合使用以降低毒性。此外還用于治療晚期腎癌。也正在進行對神經內分泌腫瘤、淋巴瘤、其他癌癥以及結節性硬化癥的研究，可作為單一制劑或者與現有的癌癥治療方法合用。

由于在制備依維莫司關鍵中間體的時候，雷帕霉素有大量不能反應，而雷帕霉素與依維莫司在最后樣品中又很難分離，所以在中間體這一步將雷帕霉素除掉是相當必要的。但是在依維莫司分離純化的過程中由于依維莫司對光、熱、酸、堿等均不穩定，并且還存在主峰與異構體之間的相互轉化，常常在分離過程中有分解現象，給分離純化帶來了一定的難度。目前尚沒有太好的分離方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種操作簡單、去除雷帕霉素殘留效果明顯、樣品穩定的依維莫司分離純化方法。

本發明是這樣實現的：

依維莫司分離純化方法，具體如下：

將含有雷帕霉素的依維莫司中間體或中間體的反應液用烷烴加熱溶解，再用含水有機溶劑洗滌，洗滌掉雷帕霉素，將烷烴濃縮干，得到雷帕霉素殘留量重量百分數小于0.1％的中間體。

本發明所述的中間體為：

按照美國專利US5665772描述的方法，將上述中間體或中間體的反應液合成得到依維莫司粗品。

將依維莫司粗品用5倍重量的乙醇溶解后，加含體積百分數為1％的甲酸水溶液將乙醇的體積濃度調到50％后，上反相樹脂，再用乙醇和含1％醋酸的水溶液梯度洗脫，收集合并濃縮得依維莫司半成品。

將依維莫司半成品用異丙醚溶解后上正相填料柱分離，再用四氫呋喃和異丙醚梯度洗脫，分段收集后，合并后，在35℃以下減壓濃縮，得依維莫司成品。

其中，所述的烷烴為戊烷、己烷、庚烷中的一種。

所述的含水有機溶劑包括甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、乙腈、四氫呋喃、二氧六環的水溶液中的任意一種，含水量在20％～80％重量分數。

所述的用含水有機溶劑洗滌，是利用含水有機溶劑萃取洗滌掉雷帕霉素。

所述的萃取溫度為10～30℃。

所述的反相樹脂，是512樹脂。

所述的正相填料柱內填充的正相材料是C1、C2、C3、C4、CN或乙二醇基中的任意一種。

本發明提供的依維莫司純化方法。首先，用萃取的方法將中間體中的雷帕霉素除去，得到幾乎不含雷帕霉素的中間體，再將中間體合成得到依維莫司，這樣得到的依維莫司因為不含有雷帕霉素，所以分離純化就相當簡單。再通過一次反相樹脂分離和一次正向填料柱分離后，得到穩定的依維莫司樣品。該方法操作簡單，具有良好的工業應用前景。

具體實施方式

下面就本發明每一步驟進行具體論述：

將中間體反應液125g(含中間體約50g，歸一法，雷帕霉素含54.32％，中間體37.76％)用1250mL正己烷溶解后，加60％的甲醇1250mL萃取洗滌3次，將正己烷層干燥后濃縮干的68g，(中間體歸一法計92.31％，雷帕霉素0.09％)。