[發明專利]一種測定SDS敏感蛋白酶活力的酶譜方法

有效

• 申請號: 201110052625.9
• 申請日: 2011-03-07
• 公開（公告）號: CN102181515A
• 公開（公告）日: 2011-09-14
• 發明（設計）人: 王一明;朱泓;林先貴
• 申請（專利權）人: 中國科學院南京土壤研究所
• 主分類號: C12Q1/37
• 分類號: C12Q1/37;G01N27/447
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 樓高潮

1.一種測定SDS敏感蛋白酶活力的酶譜方法，包括凝膠配制步驟和電泳步驟，其特征在于電泳用聚丙烯酰胺凝膠由兩種不同組分配比的聚丙烯酰胺凝膠組成：

a.?聚丙烯酰胺凝膠I由3質量份丙烯酰胺混合溶液I和1質量份濃縮膠緩沖液組成，其中：

（1）丙烯酰胺混合溶液I由丙烯酰胺、過硫酸銨、N,N,N′,N′-四甲基二乙胺（TEMED）和超純水組成，該溶液中丙烯酰胺質量體積比為6.67%、過硫酸銨質量體積比0.133%、N,N,N′,N′-四甲基二乙胺（TEMED）質量體積比0.133%，pH?6.8;

（2）濃縮膠緩沖液為?0.5?mol/L?Tris-HCL溶液，pH?6.8;

b.?聚丙烯酰胺凝膠II由3質量份丙烯酰胺混合溶液II和1質量份分離膠緩沖液組成，其中：

（1）丙烯酰胺混合溶液II由丙烯酰胺、明膠、過硫酸銨、N,N,N′,N′-四甲基二乙胺（TEMED）和超純水組成，該溶液中丙烯酰胺質量體積比為13.33%、過硫酸銨質量體積比0.133%、N,N,N′,N′-四甲基二乙胺（TEMED）質量體積比0.133%、明膠質量體積比0.133%，pH?8.8;

（2）分離膠緩沖液為?1.5?mol/L?Tris-HCL溶液，pH?8.8;

c.?上述兩種聚丙烯酰胺凝膠分別配制完成后，按照體積比聚丙烯酰胺凝膠I：聚丙烯酰胺凝膠II=2:5，用于制備電泳用聚丙烯酰胺凝膠。

2.根據權利要求1所述的測定SDS敏感蛋白酶活力的酶譜方法，其特征在于電泳緩沖液中含有0.5‰?SDS。