[發(fā)明專利]一種疫苗黏膜免疫佐劑分子的制備方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110038963.7 | 申請日： | 2011-02-16 |
| 公開（公告）號： | CN102382853A | 公開（公告）日： | 2012-03-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 馬興元;姚碧;鄭文云;劉琨 | 申請（專利權(quán)）人： | 華東理工大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/70 | 分類號： | C12N15/70;C07K14/245;A61K39/39 |
| 代理公司： | 上海翼勝專利商標事務(wù)所(普通合伙) 31218 | 代理人： | 翟羽 |
| 地址： | 200237 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 疫苗 黏膜 免疫佐劑 分子 制備 方法 | ||
1.一種疫苗黏膜免疫佐劑分子的制備方法，所述黏膜免疫佐劑為大腸桿菌熱敏感毒素LT、大腸桿菌熱敏感毒素突變體LTm以及大腸桿菌熱敏感毒素亞基蛋白LTA與LTB，其特征在于，將不同亞基蛋白LTA、LTB或全蛋白質(zhì)LT分別構(gòu)建于不同的表達框以調(diào)節(jié)多亞基蛋白LT、突變體及其亞基的表達量。
2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種疫苗黏膜免疫佐劑分子的制備方法，其特征在于，利用pCDFDuet-1和pTYB11兩類載體，在基因水平將LT突變體LTm或其LTA或LTB亞單位基因或LTA的突變體LTAm的原核表達載體pCDFDuet-1-LTAm-LTB、pCDFDuet-1-MCS1-LTm、pCDFDuet-1-LTB-LTm、pCDFDuet-1-MCS1-LTB、pCDFDuet-1-LTB-LTm、pTYB11-LTB-EGFP、pTYB11-LTB或pTYB11-LTm中的一種或幾種轉(zhuǎn)化到BL21感受態(tài)細胞中。
3.?根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種疫苗黏膜免疫佐劑分子的制備方法，其特征在于，表達質(zhì)粒為pCDFDuet-1-LTAm-LTB、pCDFDuet-1-MCS1-LTm或者pTYB11-LTB中的一種或幾種。
4.?根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種疫苗黏膜免疫佐劑分子的制備方法，其特征在于，工程菌BL21/pTYB11-LTB的誘導(dǎo)表達條件為：在2×YT培養(yǎng)基之中，在37℃生長到OD600=0.8后，轉(zhuǎn)至20℃下培養(yǎng)，以IPTG終濃度0.4mM進行誘導(dǎo)8h。
5.?根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種疫苗黏膜免疫佐劑分子的制備方法，其特征在于，所述LTm包括LTm7，LTm63，LTm112和LTm192。
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