[發(fā)明專利]一種新的宮頸癌細(xì)胞株（N-Caski）及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110031528.1
• 申請日: 2011-01-29
• 公開（公告）號: CN102154214A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 謝幸;周建松;呂衛(wèi)國;葉楓;程曉東;王新宇;王小云;洪蝶;彭嬋娟
• 申請（專利權(quán)）人: 謝幸;浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/113;C12N15/867;C12Q1/02;C12R1/91
• 代理公司: 杭州豐禾專利事務(wù)所有限公司 33214
• 代理人: 王從友

1.一種新的宮頸癌細(xì)胞株（N-Caski），其特征在于：該宮頸癌細(xì)胞株（N-Caski）保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號為：CCTCC?NO.?C2010128。

2.一種如權(quán)利要求1所述的宮頸癌細(xì)胞株（N-Caski）的建立方法，其特征在于該方法包括以下步驟：

1）選取針對HPV16型E6/E7共同啟動子區(qū)的干擾效果較好的SiRNA序列,并設(shè)計符合慢病毒載體要求的shRNA序列，shRNA序列的編碼鏈序列如SEQ?ID?NO:1所示，隨從鏈序列如SEQ?ID?NO:2所示；

2）構(gòu)建宮頸癌HPV16?E6/E7啟動子基因shRNA重組慢病毒載體，篩選出高滴度慢病毒；

3）轉(zhuǎn)導(dǎo)Caski細(xì)胞，抗生素篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種宮頸癌細(xì)胞株（N-Caski）的建立方法，其特征在于載體選用pLenti6/BLOCK-iT-DEST載體。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的宮頸癌細(xì)胞株（N-Caski）用于作為宮頸癌HPV16?E6/E7癌基因的致病機(jī)制的探討及相關(guān)信號通路的研究的細(xì)胞模型。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的宮頸癌細(xì)胞株（N-Caski）用于宮頸癌治療藥物的挑選及驗(yàn)證。

6.shRNA序列，其特征在于：該shRNA序列的編碼鏈序列如SEQ?ID?NO:1所示，隨從鏈序列如SEQ?ID?NO:2所示。